PH0539 Annexin V-FITC/PI 凋亡检测试剂盒 科研专用 Phygene
产品名称： PH0539 Annexin V-FITC/PI 凋亡检测试剂盒 科研专用 Phygene
英文名称： Annexin V-FITC/PI
产品编号： PH0539
产品价格： 0
产品产地： CN
品牌商标： Phygene
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使用范围： null
福州飞净生物科技有限公司
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货号 PH0539
名称 Annexin V-FITC/PI 凋亡检测试剂盒（Annexin V-FITC/PI Apoptosis Assay Kit）
存储 Store at 4℃ ，一年有效。
产品组分
>>Annexin V-FITC-----------250ul
>>10×Binding Buffer-------2*13ml
>>Propidium Iodide(PI)----500ul
产品简介
细胞凋亡（Apoptosis）是一种由基因控制的细胞自主死亡方式。它与组织器官的发育，机体正常生理功能的维持，某些疾病的发生发展以及细胞癌变过程均有着密切的关系。细胞凋亡已成为生命学科极为活跃的研究领域之一。此外，介绍几种常用的细胞凋亡检测方式。在细胞凋亡的早期，细胞膜表面的磷脂酰丝氨酸（Phosphatidylserine，PS）将会从细胞膜内侧转移到细胞膜外侧，使PS充分暴露在细胞膜外表面。Annexin V是一种磷脂结合蛋白，对PS有高度的亲和力。因此，Annexin V作为一个敏感的探针可以有效地检测暴露在细胞膜表面的PS。目前普遍使用的检测方法是将荧光标记后的Annexin V-FITC作为探针，利用流式细胞仪来检测细胞凋亡。
值得注意的是，在细胞坏死的过程中也会发生PS的暴露。但两者的差别在于细胞凋亡的初始阶段细胞膜结构是完好的，只有PS转移，而细胞坏死则在早期阶段细胞膜的完整性就破坏了，从而暴漏出PS。因此，检测细胞凋亡时，通常会使用颜料碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）以确立细胞膜的完整性。PI是一种核酸染料，它可以染色死细胞，但不能进入完整的活细胞，从而将凋亡性细胞和坏死性细胞区分开来。
产品特点
*快速简单，一次测试仅需10 分钟；
*组成为：FITC-Annexin V、结合缓冲液、PI；
*和DNA检测方法相比，能够更早地检测到凋亡细胞；
*准确：能准确区分正常细胞、早期凋亡细胞、晚期凋亡细胞和坏死细胞，并计数各群细胞的比例。
使用说明
1、 细胞收集与Annexin V-FITC结合
（1）在完成细胞凋亡诱导处理后，1500rpm，5分钟离心后弃上清，收集细胞。（贴壁细胞收集：先用PBS洗涤贴壁细胞一次，再用胰酶消化液解离细胞。1500rpm离心5分钟，弃上清收集细胞。）
（2）用PBS重新悬浮细胞，并计数。（如用含有EDTA胰酶细胞消化液消化细胞，建议将收集的细胞用PBS再洗涤一次。）
（3）取1～5×105细胞悬浮液，1500rpm，5分钟离心后弃上清，加入500ul的1×Binding Buffer。（用蒸馏水1:9稀释10×Binding Buffer）
（4）加入5ul Annexin V-FITC，再加入10ul Propidium Iodide，轻轻混匀。
（5）在室温下，避光反应5～15min。
（6）在1小时内进行流式细胞仪或荧光显微镜检测。（如需更长时间保存，细胞可先用1×Binding Buffer洗涤后再用2%甲醛固定。固定的细胞混匀重悬即可进行检测。）
2、 流式细胞仪分析
（1） 设定：激发波长Ex=488nm：发射波长Em=530nm。Annexin V-FITC的绿色荧光FITC通道为FL1；PI红色荧光通过PI通道为FL2。使用未经凋亡诱导的正常细胞作为对照，进行荧光补偿调节。
3、 荧光显微镜观察
（1）如果用于荧光显微镜下检测，1500g离心5分钟，收集细胞。用50-100ul 1×BindingBuffer轻轻重悬细胞。取一滴细胞悬浮液于载玻片上，盖玻片观察。
（2）采用双色滤光片，Annexin V-FITC荧光呈绿色，PI荧光呈红色。
注意事项
1、 如果是贴壁细胞，也可直接用盖玻片培养和诱导细胞凋亡。
2、 Propidium Iodide （PI）有毒，需戴手套操作使用。
3、 本试剂盒适用范围为动物性细胞或组织。植物细胞组织，植物性海藻等不建议使用。
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