ProClin300诊断试剂防腐

    为解决生物样本处理过程中保存期短问题，上海闪晶分子生物科技有限公司推出SUPELCO公司新一代高效生物防腐剂ProClin300，可以有效地控制体外诊断试剂中微生物的生长。当浓度达到0.02%条件下，ProClin系列防腐剂具有广谱抗菌活性，能在比较长的时间内抑制细菌、真菌和酵母菌等微生物的生长；同时，它又能保持体系中酶的活性，因此它是一种理想的可替代硫*撒、叠氮化钠和庆大霉素等生物防腐剂。

一、ProClin 系列防腐剂的优点

• 广谱抗菌性，作用速度快；良好的与酶的相容性，不会影响与酶或抗体的相关反应。
• 使用剂量少，6-20ppm的ProClin300即可达到抑菌的目的。
• pH适用范围广（pH2-8.5^*）,化学稳定性好。经实验室检测，在25度下保存2年，该防腐剂的活性组分仅损失3%。
• 毒性远低于同类产品硫柳*。
• 与水可以任意比混合。

二、ProClin 系列防腐剂作用原理

ProClin 系列防腐剂的活性成分主要是2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮（MCI）和5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮（CMCI）。这两种成分抑制细胞的生长以及促使细胞凋亡的原理相同。活性成分在与细胞膜接触几分钟后，立即可以渗透到膜内并抑制细胞内酶的活性（见图1）。目标酶处于细胞代谢KREBS循环的中心位置，ProClin 系列防腐剂作用KREBS循环的四个不同位置(见图2)：丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase)，a -酮戊二酸脱氢酶(ketoglutarate dehydrogenase)，琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase)和NADH脱氢酶(NADH dehydrogenase)。从而抑制细胞生长代谢，大分子的合成，引起细胞内能量水平迅速下降。由于能量体系的崩溃，细胞不能合成日常代谢所需要的化合物。所有的细菌及真菌至少拥有部分KREBS循环，所以ProClin 系列防腐剂的适用的范围非常广泛。其次，ProClin 系列防腐剂具有多标靶作用位点，因此大大降低了因变异产生的微生物的耐药性。随着KREBS循环被阻断，细胞产生能量（以合成ATP为标志，见图3）和合成酶等生物活性物质的能力迅速下降，但其使用剂量却保持比较低的水平对人畜无害。

三、ProClin 系列防腐剂性能

1.     ProClin 系列防腐剂对诊断试剂影响：

实验数据表明，ProClin 系列防腐剂不会对诊断试剂中的关键酶与底物的结合速率产生影响比如：辣根过氧化酶（HRP），碱性磷酸酶（AP）。

图4. 250ppmProClin300对HRP(AP)与底物结合速率的影响

短期效应

即使ProClin300的使用浓度超过推荐浓度15倍时，其短期内对于HRP和AP的Km和Vmax 无影响（见表1）。

表1.ProClin300对HRP和AP的Vmax的影响

　 长期效应

长期使用ProClin 300同样不会对酶（例如：HRP和AP，见图5）的活性产生影响。

图5. 4度(37度)下ProClin对AP (HRP)活性的影响 2.     ProClin系列防腐剂对抗体结合的影响

在推荐使用浓度下，ProClin 系列防腐剂不会对抗体的结合产生影响。通过研究ProClin 300对经纯化过小鼠IgM抗原与联结HRP的抗-小鼠IgM抗体之间结合的影响，表明浓度在300ppm以下，ProClin 300不会对其产生影响（见图6）。50ppm的ProClin 300保存上述抗体35天同样无影响。

图6. ProClin300对连接HRP的抗体影响                                              四、ProClin系列防腐剂的参数