蛋白质组学定量分析iTRAQ,SILAC,DIGE
产品名称： 蛋白质组学定量分析iTRAQ,SILAC,DIGE
英文名称： iTRAQ,SILAC,DIGE
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更新时间： 2023-09-21T16:15:32
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广州辉骏生物科技有限公司
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同位素标记相对和绝对定量技术（iTRAQ）
iTRAQ ( Isobaric tag for relative and absolute quantitation ) 采用液质联用的方法高通量地检测多组别间的蛋白
技术优势
1、 高通量，可同时对8个样本进行分析
2、 体外标记，适用范围广
3、 分离能力强，定量结果可靠
4、 高灵敏度，检测限低，可检测出低丰度蛋白
5、 自动化程度高：液相与质谱连用分析速度快
荧光差异双向电泳技术（DIGE）
DIGE即荧光差异凝胶电泳，是在双向电泳的基础上，使用三种荧光染料（Cy2、Cy3、Cy5）标记不同组别的蛋白，并在同一张凝胶上对标记的3种蛋白混合物同时进行电泳的多路线分离技术。其中Cy3和Cy5分别标记两组样本的蛋白，Cy2标记所有组别蛋白的混合物，作为内参使用。电泳分离后，在激光扫描仪中用三种不同波长的激光进行扫描，在同一张凝胶中可得到3组蛋白的图谱。利用比对软件，给出各组间蛋白的准确定量信息；借助于质谱仪，还可定性差异蛋白。
技术优势
1、灵敏度高，最低可检测到125pg的蛋白质
2、高效性，在一块凝胶上可同时电泳2个实验样品
3、线性范围广，动态范围高达10-5
4、定量精确，引入内参消除了凝胶间的误差，显著提高了实验的精确度和可重复性
5、统计学分析，ImageMaster7.0（DIGE）软件自动分析，降低了操作者之间的偏差
1、灵敏度高，最低可检测到125pg的蛋白质
2、高效性，在一块凝胶上可同时电泳2个实验样品
3、线性范围广，动态范围高达10-5
4、定量精确，引入内参消除了凝胶间的误差，显著提高了实验的精确度和可重复性
5、统计学分析，ImageMaster7.0（DIGE）软件自动分析，降低了操作者之间的偏差
氨基酸中稳定同位素标记的细胞培养（SILAC）
服务简介
SILAC（stable isotope labeling with amino acid in cell culture）即细胞培养条件下稳定同位素标记技术。细胞用含有轻、中、重型同位素的必需氨基酸培养基培养，经过6代以上的培养，细胞内的蛋白被稳定同位素完全标记。收获细胞样品，裂解不同标记的细胞，提取蛋白并等比例混合，经分离、纯化后进行质谱鉴定。质谱仪可检测到成对出现的肽段信号峰，通过软件比对得到蛋白质的定性信息和相对定量信息。
SILAC（stable isotope labeling with amino acid in cell culture）即细胞培养条件下稳定同位素标记技术。细胞用含有轻、中、重型同位素的必需氨基酸培养基培养，经过6代以上的培养，细胞内的蛋白被稳定同位素完全标记。收获细胞样品，裂解不同标记的细胞，提取蛋白并等比例混合，经分离、纯化后进行质谱鉴定。质谱仪可检测到成对出现的肽段信号峰，通过软件比对得到蛋白质的定性信息和相对定量信息。
技术优势
1、 体内标记，更接近于样品真实状况
2、 灵敏度高，样本需求量少
3、 高通量，可同时鉴定并定量数百至数千种蛋白质
4、 定量用的线性范围广
5、 采用高分辨率质谱定量，定量结果准确，重复性好
2、 灵敏度高，样本需求量少
3、 高通量，可同时鉴定并定量数百至数千种蛋白质
4、 定量用的线性范围广
5、 采用高分辨率质谱定量，定量结果准确，重复性好