NanoSep™CD3 分选磁珠(NanoSep^™CD3 beads)

产品货号：TL-622

♦产品描述

纳米级 CD3 分选磁珠可用于分选人 CD3⁺T 细胞，通过在磁珠上偶联抗人CD3 单克隆抗体，实现 CD3⁺T 细胞的分选。该磁珠有多种用途，既能够从PBMC 中分离去除 CD3⁺细胞，也能够从 PBMC 中富集 CD3⁺细胞，起到去除T细胞或者纯化T 细胞的作用和功能。

♦ 反应种属

人

♦内毒素

<2EU/mL

♦ 性状

棕色液体

♦ 储存条件

2~8℃

♦ 有效期限

6个月

♦ 使用方法

实验步骤： 

1.1 将人的PBMC细胞重悬于含1% HSA的PBS缓冲液中，取样计数，取1×10⁷个细胞至1.5mL EP 管中，1500rpm，离心5min。 

1.2 弃上清，若进行去除分选，取80μL MACS Running buffer (130-091-221) 溶液重悬细胞，加入20μL CD3分选磁珠；若进行富集分选，取90μL MACS Running buffer溶液重悬细胞，加入10μL CD3分选磁珠，混匀后将其放入2~8℃冰箱孵育15min。

1.3 取LS分选柱 (130-042-401) 放入MACS分选器 (130-042-303) 上，用1mL MACS Running buffer润洗两次。

1.4 将孵育完成后的样品从2~8℃冰箱取出，加入1mL MACS溶液，1500rpm，5min离心，弃上清。

1.5 加入1mL MACS Running buffer重悬，将样品加入分选柱中，待其自然流出后，分两次加入 Running buffer，每次加1mL，15mL离心管收集流出液。

1.6 待MACS Running buffer全部流出后，将分选柱从MACS分选器上取下，放到另一新的15mL 离心管中，向分选柱中加入3mL MACS Running buffer，用LS分选柱配套活塞将液体直接打出。

1.7 将装有收集液的15mL离心管放入水平离心机，1500rpm，离心5min。 

1.8 离心完成后倒掉上清，取1mL 1×DPBS溶液重悬细胞，计数并进行流式检测。

注意事项： 1. 磁珠与细胞孵育时需要彻底混匀，以提高分选效率。