产品内容：
试剂一：110mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：1mL×1支，-20℃避光保存；
试剂三：液体20mL×1瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×1支，4℃保存；
试剂五：粉剂×1支，-20℃保存；
试剂六：粉剂×1支，4℃保存；临用前加入1mL蒸馏水
试剂七：粉剂×1支，4℃保存；
工作液的配制：临用前把试剂四、试剂五、0.5mL试剂六和试剂七转移到试剂三中混合溶解待用。
产品说明：
    PDH（EC 4.1.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是丙酮酸脱氢酶复合体(PDHC)催化丙酮酸氧化脱羧的限速酶，催化丙酮酸脱梭生成羟乙基-TPP，把糖酵解和三羧酸循环连接起来。PDH催化丙酮酸脱氢，同时还原2,6-二氯酚靛酚（2,6-DCPIP），从而导致605nm光吸收的减少。
 
试验所需自备仪器和样品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、PDH的提取
准确称取0.1g组织或收集500万细胞，加入1mL试剂一和10uL 试剂二，用冰浴匀浆器或研钵匀浆充分研磨，4 ℃ 11000 g离心10min，取上清，置冰上待测。
二、测定步骤
1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至605nm，蒸馏水调零。
2、 每个样本需要180μL工作液，按样本数取出一定量的工作液置于37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴10min。
3、 空白管：在微量比色皿或96孔板中加入180μL工作液和10μL水，混匀，立即记录605nm处初始吸光值A1和 1min后的吸光值A2，计算ΔA=A1-A2。
4、 测定管：在微量比色皿或96孔板中加入180μL工作液和10μL样本，混匀，立即记录605nm处初始吸光值A3和 1min后的吸光值A4，计算ΔA=A3-A4。
三、PDH 活性计算
a.用微量比色皿测定的计算公式如下
（1）按样本蛋白浓度计算
单位的定义：每mg组织蛋白在反应体系中每分钟消耗1 nmol 2,6-二氯酚靛酚定义为一个酶活性单位。
PDH活性（U/mg prot）＝[(ΔA测定-ΔA空白)÷（ε×d）×V反总×109]÷(Cpr×V样) ÷T
                      =904.762×(ΔA测定-ΔA空白)÷Cpr
（2）按样本鲜重计算
单位的定义：每g组织在反应体系中每分钟消耗1 nmol 2,6-二氯酚靛酚定义为一个酶活性单位。
PDH活性（U/g 鲜重）＝[(ΔA测定-ΔA空白)÷（ε×d）×V反总×109]÷(V样÷V样总×W) ÷T
                     =913.81×(ΔA测定-ΔA空白)÷W
（3）按细菌或细胞密度计算
单位的定义：每1万个细菌或细胞在反应体系中每分钟消耗1 nmol 2,6-二氯酚靛酚定义为一个酶活性单位。
PDH活性（U/104 cell）＝[(ΔA测定-ΔA空白)×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样÷V样总×500)÷T
                     =1.828×(ΔA测定-ΔA空白)
    V反总：反应体系总体积，1.9×10-4 L；ε：2,6-二氯吲哚酚摩尔消光系数，2.1×104L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.01 mL；V样总：加入试剂一和试剂二体积，1.01 mL；T：反应时间，1 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样品质量，g；500：细菌或细胞总数，500万。
b.用96孔板测定的计算公式如下TUNEology 波长可调检测卡盒-->