细胞电转缓冲液A
产品名称: 细胞电转缓冲液A
英文名称: Cell electrotransfer buffer A
产品编号: CPB011
产品价格: null
产品产地: null
品牌商标: null
更新时间: 2024-01-08T13:05:17
使用范围: null
上海启文生物科技有限公司
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一、使用效果
1、本电转缓冲液可以用于mRNA的电转
实例:静息状态的人T细胞在电转GFP mRNA 24小时后, 使用荧光显微镜下观察,T细胞呈现绿色。
2、本电转缓冲液可以用于电转CRISPR/Cas9组份,实现T细胞基因编辑。
实例:使用CRISPR/Cas9敲除T细胞TCR。分离T细胞后使用Dynabeads激活。激活三天后,使用混有CRISPR/Cas9组份的电转缓冲液进行电转。电转完成后对T细胞进行培养。在激活第九天使用流式细胞术对基因编辑效率进行验证。
T细胞在激活第九天进行CD3染色,TCR敲除的T细胞CD3不能到达细胞膜,因此细胞染色为阴性。右图显示TCR敲除效率约为70%。
二、电转操作流程:
1.T细胞计数;
2.取一定数量的T细胞,离心收集(1500rpm,5min);
3.离心后弃上清,使用T细胞电转缓冲液(4摄氏度)重悬细胞;
4.离心(1500rpm,5min);
5.同样步骤再重复步骤3-4两次;
6.清洗完成后,使用100uL-200uL电转缓冲液重悬细胞;
7.设定电转参数;
8.将细胞悬液转移到电极杯杯内;
9.将电极杯放入电转槽;
10.启动电转;
11.电转完成后尽快将细胞转移到T细胞培养基中;
12.细胞培养。
三、产品规格:
货号 | 产品介绍 |
CPB001 | 电穿孔缓冲液,用于T细胞,100ml |
四、使用范围:
本产品只能用于科研,不能用于临床。
五、保存条件:
1. 2 - 8℃,2年;
2. 每次使用均需要无菌操作,避免交叉污染。