Taq DNA聚合酶

产品及特点

本产品是Thermus aquaticus （水生栖热菌）的DNA聚合酶基因在E. coli 中表达而得，具有以双链DNA为模板的5→3聚合酶活性和5→3外切酶活性。Taq DNA聚合酶长为832个氨基酸，分子量为 94 Kd。该酶可以广泛用于PCR、RT-PCR和加尾反应等。其特点如下：

1. 具耐热DNA聚合活性。该酶在90℃以上几乎无DNA合成，在75～80℃时延伸率约150个核苷酸/秒，70℃时为60个核苷酸/秒，55℃时为24个核苷酸/秒。在65-68℃并有Mn2+存在时还具有逆转录活性。

2. 热稳定。在PCR混合物中95℃保温40 分钟仍可保持50%的活性。

3. Mg2+离子依赖性。MgCl2浓度在2.0 mM时该酶催化活性最高。

4. 本酶无3→5外切活性，不具3→5校对功能，碱基错配机率为2.1×10-4。

质控标准

1. 功能检测，以λ DNA为模板，特定引物扩增2-20 Kb PCR片段。

2. 核酸内切酶活性检测（切刻酶活力），在50 μL反应缓冲液中，将20单位的酶和1 μ g ΦX174 RFⅠ型DNA于 72℃ 或37℃条件下共育4小时，<5%的DNA转变为RFⅡ型。

3. 核酸外切酶活性，在50 μ L反应缓冲液中，将20单位的酶和1 μ g λ DNA/HindⅢ消化产物于72℃ 或37℃条件下共育4小时，没有观察到明显带型变化。

4. 核酸酶活性检测:在50 μL反应缓冲液中，将1 μg λ DNA与20单位的酶于72℃保温16小时，无明显DNA降解发生。