AAV在体自噬流检测

自噬简介

          细胞自噬(autophagy or autophagocytosis)：又称为Ⅱ型细胞死亡，是细胞在自噬相关基因(autophagy related gene，Atg) 的调控下利用溶酶体降解自身受损的细胞器和大分子物质的过程。

 目前根据发生过程分为三类：Macroautophagy，Microautophagy和Chaperone-mediated autophagy CMA)。

 大自噬（Macroautophagy）：即我们说的自噬（autophagy）;

 微自噬（Microautophagy）：是指溶酶体主动、直接吞噬胞浆成分的一种方式;

 分子伴侣介导的自噬 (Chaperone-mediated autophagy，CMA)：一些分子伴侣，如hsp70，能帮助未折叠蛋白转位入溶酶体。通常说的自噬泛指Macroautophagy.

自噬的过程

1）：细胞接受自噬诱导信号后，在胞浆的某处形成一个小的类似“脂质体”样的膜结构，然后不断扩张，被称为Phagophore。
2）：Phagophore不断延伸，将胞浆中的任何成分，全部揽入，然后“收口”，成为密闭的球状的autophagosome，即“自噬体”。
3）：自噬体形成后，可与细胞内吞的吞噬泡、吞饮泡和内体融合（这种情况不是必然要发生的）。
4）：自噬体与溶酶体融合形成autolysosome，期间自噬体的内膜被溶酶体酶降解，2者的内容物合为一体，自噬体中的“货物”也被降解，产物（氨基酸、脂肪酸等）被输送到胞浆中供细胞重新利用，而残渣或被排出细胞外或滞留在胞浆中。

图1. 自噬的过程图

最有效的在体自噬流检测工具：AAV-mRFP-GFP-LC3

         汉恒生物技术工程师构建RFP-GFP-LC3双标的腺相关病毒（AAV）载体，包装成双标的腺相关病毒，可在体观察自噬，实时检测自噬流的强弱，更加准确、清晰、直观！弥补了LC3自噬双标腺病毒在体转染的缺陷，并且可根据组织器官的亲和性，选择不同的AAV血清型，是最有效的载体自噬流检测工具！

图2. AAV-mRFP-GFP-LC3指示载体脑组织自噬流

（Cell Death Dis.2013 Nov 14;4:e917）

AAV载体不同血清型

研究发现 AAV 具有多种血清型，各种不同血清型的 AAV 载体的主要区别是衣壳蛋白不同，因此对不同的组织和细胞的转染效率存在差异。目前汉恒生物在包装腺相关病毒时有12 中不同的 AAV 血清型可供客户选择，建议客户针对不同组织器官选择相应血清型的 AAV 病毒，见表 1。

表1.12种不同血清型AAV对各组织器官细胞的亲和性

AAV其他相关特色服务

1.    腺相关病毒AAV包装服务

2.    在体敲除AAV-SaCas9包装服务

3.    AAV光遗传技术服务