单克隆抗体制备服务
产品名称： 单克隆抗体制备服务
英文名称： Monoclonal antibody preparation service
产品编号：
产品价格： 8000
产品产地： null
品牌商标： null
更新时间： null
使用范围： null
柏奥易杰（北京）科技有限公司
- 联系人 :
- 地址 : 北京市海淀区学院路20号炼化楼319
- 邮编 : 100083
- 所在区域 : 北京
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- 邮箱 : bio_easy@126.com
单克隆抗体制备服务
客户可以根据要求选择需要服务的步骤，或者一站式制备服务更加优惠。
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步骤 |
内容 |
时间 |
标准 |
收费 |
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抗原制备 |
提供多肽序列，或Genbank号，公司负责合成多肽，偶联KLH及偶联检测载体BSA(OVA) |
2周 |
多肽合成，10mg纯度>95% |
￥128/A |
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偶联KLH 2mg |
￥1280 | |||
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偶联BSA(或者OVA) 2mg |
￥780 | |||
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客户只提供Genbank号 |
4周 |
构建含有客户认可抗原序列的原核表达载体，进行蛋白表达纯化，制备可供免疫的抗原 |
￥4000 | |
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客户提供能正常表达的菌株 |
2周 |
进行表达、纯化制备免疫抗原 |
￥2000 | |
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客户选择真核表达 |
4周 |
构建含有Flag标签的真核表达载体，293细胞表达目的抗原，用偶联Flag单抗的beads亲和纯化目的融合蛋白作为抗原 |
询价 | |
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提取天然蛋白 |
2周 |
提取天然蛋白最为抗原 |
询价 | |
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免疫 |
三次免疫后（效价达不到融合要求继续免疫）测尾血效价 |
5周 |
免疫5只Bablc小鼠，免疫量50ug/只,最终达到融合效价>1:10000 |
￥1000 |
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加强免疫 |
融合前3-5天加强免疫 |
1天 |
蛋白透析，无佐剂50ug/只 |
￥50 |
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融合 |
PEG1450 （sigmaP7306）
HAT（Invitrogen 21060017 ）血清(Hyclone SH30084.03 ) |
1天 |
取脾脏分离成单细胞与对数期的SP2/0按5：1混合，进行细胞融合，20%胎牛血清，HAT选择培养基，铺10块96孔板 |
￥5000 |
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上清检测 |
融合7天后，ELISA检测，用检测抗原包被ELISA板，二抗anti-mouse HRP，TMB显色 |
1天 |
阴性（正常培养基）OD<0.1阳性OD>0.5视为阳性孔 |
￥2000 |
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亚克隆 |
对阳性孔采用有限稀释法进行亚克隆直到含有细胞的所有孔均为阳性 |
4周 |
ELISA检测挑选OD值高的细胞孔，进行后续亚克隆直到含有细胞的所有孔均为阳性 |
￥8000 |
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定株 |
阳性稳定的孔进行扩大培养 |
1周 |
扩大培养上清，按客户要求进行功能检测（WB/ELISA/IHC），满足客户要求后，将应客户要求交付细胞（每株细胞2管） |
￥5000 |
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腹水 |
指定细胞株生产10mL腹水 |
1周 |
离心后10mL腹水 |
￥2000 |
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亚型 |
应客户要求测定细胞株亚型 |
1周 |
采用（Sigma ISO2）测定亚型 |
￥2000 |
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纯化 |
ProteinA 或G纯化10mL腹水 |
1周 |
根据亚型选择ProteinA 或G |
￥2000 |
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配对 |
纯化后的抗体进行竞争实验 |
3周 |
确定不同克隆之间是否配对 |
询价 |
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标记 |
FITC/HRP/BIOTIN/AP等 |
1周 |
应客户要求对抗体进行标记 |
询价 |