TA克隆

在使用PCR扩增目的基因片段的过程中，由于不清楚目的基因序列，并不能确定是否获得单一的PCR产物，要获得的目的片段，通常需要采用TA克隆的方法。PCR反应使用的聚合酶具有末端转移的活性，通常在3′端加上polyA，把PCR片段与一个具有3’-T的载体DNA连接转化，便可获得单克隆，通过测序得到DNA序列。

技术路线:

ta克隆

研究内容:

测序峰图

技术参数：

1、样本要求:

（1） PCR产物已纯化

片段长度（bp）	平均浓度（ng/μL）	样品量（μL）
100～1500	15	≥15
1500～3000	25	≥15

（2） PCR产物未纯化

片段长度（bp）	平均浓度（ng/μL）	样品量（μL）
100～1500	30	≥30
1500～3000	50	≥30

2、项目执行周期:

标准的项目执行周期约为5个工作日

3、完成指标及提交结果:

（1）完成指标：测序数据质量达到Q20；

（2）提交结果：最终提交测序峰图、初步分析及结题报告。