FuniCut® DraI
产品名称： FuniCut® DraI
英文名称： FuniCut® DraI
产品编号： 15059ES60
产品价格： 165.00
产品产地： Yeasen
品牌商标： Yeasen
更新时间： 2023-11-14T14:24:08
使用范围： null
| 规格 | 价格 |
| 100T | 165.0 |
- 联系人 : 李自转
- 地址 : 上海市浦东新区天雄路166弄一号楼三层南单元
- 邮编 : 200030
- 所在区域 : 上海
- 电话 : 139****5640
- 传真 : 021-34615995-188
- 邮箱 : lizizhuan@yeasen.com
FuniCut® 系列内切酶是通过基因工程重组技术，可在5～15 min内精确完成DNA切割的快速限制性内切酶，适用于快速切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA等。FuniCut® 系列快速内切酶共用一种酶切缓冲液，从而简化了酶切反应体系，另外，有良好的酶活冗余度，可轻松处理底物过量或困难模板的酶切。
产品信息
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货号 |
15059ES60 |
|
规格 |
100 T |
|
识别位置 |
5'-TTT↓AAA-3' 3'-AAA↑TTT-5' |
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推荐反应条件 |
1×FuniCut® 缓冲液；最适37℃孵育 |
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酶活 |
5 U/μL |
|
失活条件 |
80℃孵育20 min |
| 常用搜索字词 | DraI、Dra I、Dra i、Dra1、Dra 1、DraⅠ、Dra Ⅰ、Dra |
组分信息
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组分编号 |
组分名称 |
15059ES60 |
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15059-A |
FuniCut® DraI |
100 μL |
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15059-B |
10×FuniCut® Buffer |
1 mL |
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15059-C |
10×FuniCut® Color Buffer* |
1 mL |
*10×FuniCut® Color Buffer包括红色和黄色示踪染料，可将产物直接用于凝胶电泳。FuniCut® Color Buffer的红色染料与2500 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近；黄色染料与10 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近。
储存条件
-25～-15℃保存，有效期2年。
注意事项
1.3 h孵育未表现星号活性，延时酶切可能出现星号活性。
2.受EcoKI甲基化影响，序列完全重叠，剪切阻断。
3.为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
4.本产品仅作科研用途。
使用方法
1. DNA快速酶切流程
1) 按如下建议的加样顺序配制体系反应液（冰上操作）
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组分 |
质粒DNA |
PCR产物 |
基因组DNA |
|
ddH2O |
15 μL |
16 μL |
30 μL |
|
10×FuniCut® Buffer或10×FuniCut® Color Buffer |
2 μL |
3 μL* |
5 μL |
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底物DNA |
2 μL (～1 μg) |
10 μL (～0.2 μg) |
10 μL (5 μg) |
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FuniCut® DraI |
1 μL |
1 μL |
5 μL |
|
Total |
20 μL |
30 μL |
50 μL |
*本体系指已纯化后的PCR产物。未纯化的PCR产物具备一定的离子强度，10×FuniCut® Buffer加入量可适当减少至2 μL。若下一步进行克隆等实验，酶切前需纯化PCR产物。
2) 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀（切勿涡旋），然后瞬时离心以收集挂壁液滴。
3) 37℃孵育15 min（质粒），或15～30 min（PCR产物），或30～60 min（基因组DNA）。
4) 80℃孵育20 min 即可使酶失活，停止反应（可选）。
5) 如果使用FuniCut® Color Buffer进行酶切反应，得到的产物可直接上样电泳。
2. 双酶切或多酶切
1) 每种内切酶的用量为1 μL，并根据需要适当扩大反应体系。
2) 所有内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10。
3) 如果选用的几种内切酶的最适反应温度不同，应先以最适温度低的酶开始酶切，再添加最适温度较高的酶，以较高的温度进行孵育。
3. 质粒的扩大反应体系
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组分 |
体积（20 μL） |
体积（20 μL） |
体积（50 μL）* |
|
DNA |
1 μg |
2 μg |
5 μg |
|
10×FuniCut® Buffer或10×FuniCut® Color Buffer |
2 μL |
2 μL |
5 μL |
|
FuniCut® DraI |
1 μL |
2 μL |
5 μL |
|
Total |
20 μL |
20 μL |
50 μL |
*如果总反应体系大于20 μL，可使用水浴、金属浴或沙浴，并增加孵育时间。
4. 不同DNA中的识别位点数
|
λDNA |
ΦX174 |
pBR322 |
pUC57 |
pUC18/19 |
SV40 |
M13mp18/19 |
Adeno2 |
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13 |
2 |
3 |
3 |
3 |
12 |
5 |
12 |
5. 甲基化修饰影响
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Dam |
Dcm |
CpG |
EcoKI |
EcoBI |
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无影响 |
无影响 |
无影响 |
序列完全重叠，剪切阻断 |
无影响 |
6. 不同反应缓冲液中的活性*
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反应缓冲液 |
FuniCut® Buffer |
Thermo Scientific FastDigest Buffer |
NEB CutSmart® Buffer |
Takara QuickCut™ Buffer |
|
活性 |
100% |
100% |
100% |
100% |
*活性数据来自翌圣生物限制酶标准反应体系下的检测。
Ver.CN20230814