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逆转录病毒包装

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产品名称: 逆转录病毒包装

英文名称: 逆转录病毒包装

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百奥迈科生物技术有限公司
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可提供逆转录病毒包装服务:

逆转录病毒 (Retrovirus) 是一类已知的RNA病毒。需在逆转录酶的作用下首先将RNA转变为cDNA,再在DNA复制、转录、翻译等蛋白酶作用下扩增的一类病毒。该载体系统有两部分组成,一是带有外源基因的重组反转录病毒载体分子,二是能以反式提供病毒结构蛋白的包装细胞,其要求是能高效产生感染靶细胞的重组病毒颗粒,且无野生型的反转录病毒存在,后者是基因治疗安全性的关键问题。

1.1逆转录病毒载体最大优点是:

1.1.1转染范围广,可以感染各种细胞类型,如淋巴细胞或肝细胞、肌细胞等;

1.1.2 转入的外源基因可完全整合;

1.1.3对细胞感染率高,

1.1.4感染细胞不产生病变,可建立细胞系长期持续表达外源基因。

1.2逆转录病毒载体的不足之处,如:

1.2.1只能整合至分裂期细胞;

1.2.2可插入外源基因片断小(<10kb),难以满足较大基因的插入;

1.2.3病毒滴度是限制临床应用的主要方面;

1.2.4有产生野生型病毒或辅助型病毒的可能,随机整合可能产生不良作用。

 

包装过程:

1)重组逆转录表达载体的获得及鉴定

2)包装细胞PT67的解冻培养

3)重组表达载体转染包装细胞PT67细胞

4)稳定产病毒的包装细胞的筛选

5)转染的包装细胞稳定地产病毒及病毒滴度的测定