PH0200 质粒小量提取试剂盒 质粒小提试剂盒 Phygene
产品名称： PH0200 质粒小量提取试剂盒 质粒小提试剂盒 Phygene
英文名称： Plasmid Mini Preparation Kit
产品编号： PH0200
产品价格： 0
产品产地： CN
品牌商标： Phygene
更新时间： null
使用范围： null
福州飞净生物科技有限公司
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货号 PH0200
名称 质粒小量提取试剂盒（Plasmid Mini Preparation Kit）
存储 室温保存，一年有效。
产品组分
试剂盒组成 PH0200-50 PH0200-100 储存条件
RNase A 300ul 500ul -20℃
溶液Ⅰ 15ml 30ml RT
溶液Ⅱ 15ml 30ml RT
溶液Ⅲ 20ml 40ml RT
漂洗液 15ml 15ml×2 RT
洗脱液 15ml 30ml RT
吸附柱 50个 100个 RT
收集管 50个 100个 RT
说明书 1份 1份 RT
产品简介
本试剂盒采用碱裂解法裂解细胞，根据离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合溶液中的DNA的原理特异性提取质粒DNA。 离心吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地吸附DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。 使用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、连接和转化等试验。
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA（将试剂盒中提供的 RNaseA 全部加入），混匀，置于 2-8℃保存。如非指明，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
使用步骤
1、取1-5ml细菌培养物，12000rpm离心1min，尽量吸除上清（菌液较多时可以通过多次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中）。
2、向留有菌体沉淀的离心管中加入250ul溶液Ⅰ(请先检查是否已加入RNaseA），使用移液器或旋涡振荡器彻底悬浮细菌细胞沉淀。
*注意：如果菌块未彻底混匀，会影响裂解导致质粒提取量和纯度偏低。
3、向离心管中加入250ul溶液Ⅱ，温和地上下翻转6-8次使菌体充分裂解。注意：混匀一定要温和，以免污染细菌基因组DNA，此时菌液应变得清亮粘稠，作用时间不要超过5 min，以免质粒受到破坏。
4、向离心管中加入350ul溶液Ⅲ，立即温和地上下翻转6-8次，充分混匀，此时会出现白色絮状沉淀。12000rpm离心10 min，用移液器小心地将上清转移到另一个干净的离心管中，尽量不要吸出沉淀。注意：溶液Ⅲ加入后应立即混合，避免产生局部沉淀。如果上清中还有微小白色沉淀，可再次离心后取上清。
5、将上一步所得上清液加入吸附柱中（吸附柱加入收集管中），室温放置2min，12000rpm离心1min，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
6、向吸附柱中加入700ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
7、向吸附柱中加入500ul漂洗液，12000rpm离心1min，弃废液，将吸附柱放入收集管中。
8、12000rpm离心2min，将吸附柱敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟，目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR等。
9、将吸附柱放入一个干净的离心管中，向吸附膜中央悬空滴加50-200ul经65℃水浴预热的洗脱液，室温放置2min，12000rpm离心1min。
10、为了增加质粒的回收效率，可将得到的洗脱液重新加入吸附柱中，室温放置2min，12000rpm离心1min。
注意事项
1. 使用前请先检查溶液Ⅱ和溶液Ⅲ是否出现混浊，如有混浊现象，可在37℃水浴中加热几分钟，待溶液恢复澄清后再使用。溶液Ⅱ 、溶液Ⅲ和漂洗液使用后应立即拧紧盖子。
2. 洗脱缓冲液体积不应少于50ul，体积过小影响回收效率;洗脱液的pH值对洗脱效率也有影晌，若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范围)， pH值低于7. 0会降低洗脱效率， DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。
3. 如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒，应加大菌体使用量，使用5-10ml过夜培养物，同时按照比例增加溶液Ⅰ 、溶液Ⅱ和溶液Ⅲ的用量，吸附和洗脱时可以适当的延长时间，以增加提取效率。
4. DNA浓度及纯度检测：得到的质粒DNA纯度与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。 得到的DNA可用琼脂糖疑胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。 DNA应在OD260处有显著吸收峰，OD260值为1相当于大约50ug/ml双链DNA、 40ug/ml单链DNA。OD260/OD280比值应为1.7-1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水，比值会偏低，因为pH值和离子存在会影响吸光值，但并不表示纯度低。
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货号 名称 规格
PH0101 Taq 500U
PH0101 Taq 5×500U
PH0101 Taq 2000U
PH0101 Taq 5×2000U
PH0105 Taq plus 500U
PH0105 Taq plus 5×500U
PH0105 Taq plus 1000U
PH0110 pfu 500U
PH0110 pfu 1000U
PH0113 dNTPs (2.5mM） 1ml
PH0113 dNTPs (2.5mM） 1ml*5
PH0114 dNTPs (10mM） 1ml
PH0114 dNTPs (10mM） 1ml*5
PH0116 dATP 100mM 200ul
PH0117 dGTP 100mM 200ul
PH0118 dCTP 100mM 200ul
PH0119 dTTP 100mM 200ul
PH0115 dNTP套装 （100mM）4管装 4×100ul
PH0103 2×Taq MasterMix 含染料 1000ul
PH0103 2×Taq MasterMix 含染料 5*1ml
PH0104 2×Taq MasterMix 不含染料 1000ul
PH0104 2×Taq MasterMix 不含染料 5*1ml
PH0106 2×Taq Plus MM 含染料 500ul
PH0106 2×Taq Plus MM 含染料 5×500ul
PH0107 2×Taq Plus MM 不含染料 500ul
PH0107 2×Taq Plus MM 不含染料 5×500ul
PH0108 2×Long Taq MM 含染料 0.5ml
PH0108 2×Long Taq MM 含染料 5×500ul
PH0109 2×Long Taq MM 不含染料 0.5ml
PH0109 2×Long Taq MM 不含染料 5×500ul
PH0111 2×pfu PCR MasterMix 含染料 1ml
PH0111 2×pfu PCR MasterMix 含染料 5*1ml
PH0112 2×pfu PCR MasterMix 不含染料 1ml
PH0112 2×pfu PCR MasterMix 不含染料 5*1ml
PH0122 PCR反应试剂盒（2000bp） 20次
PH0120 2×SYBR Green qPCR MasterMix 5×1ml
PH0120 2×SYBR Green qPCR MasterMix 20×1ml
PH0121 2×Taqman PCR Master Mix 1ml
PH0121 2×Taqman PCR Master Mix 5×1ml
PH0123 2×Taqman PCR Master Mix (With ROX) 1ml
PH0123 2×Taqman PCR Master Mix (With ROX) 5×1ml
PH1597 PhyScript™ qPCR RT Kit 200 Reaction
PH1598 PhyScript™ One Step RT qPCR kit (SyBR Green) 100 Reaction
PH1599 PhyScript™ One Step RT qPCR kit (Taqman Probe) 100 Reaction
PH1600 PhyLight™ Lip2000转染试剂 0.5ML | 1ML
PH0200 质粒小量提取试剂盒 50T/100T
PH0200 质粒小量提取试剂盒 200
PH0201 高纯质粒小提试剂盒 100T/200T
PH0202 质粒大提试剂盒 10T
PH0203 革兰氏阳性菌质粒小量提取试剂盒 50T/100T
PH0204 革兰氏阳性菌质粒大量提取试剂盒 10T
PH0205 无内毒素质粒小量提取试剂盒 50T/100T
PH0206 无内毒素质粒大量提取试剂盒 10T
PH0207 酵母质粒提取试剂盒 50T/100T
PH0208 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒 100T/200T
PH0209 聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒 20T/50T
PH0210 细菌基因组DNA提取试剂盒 50T/100T
PH0211 动物组织/细胞基因组DNA提取试剂盒 50T/100T
PH0212 植物基因组DNA提取试剂盒 50T/100T
PH0213 全血基因组DNA提取试剂盒 50T/100T
PH0214 酵母基因组DNA提取试剂盒 50T/100T
PH0215 通用基因组DNA提取试剂盒 50T/100T
PH0216 真菌基因组DNA提取试剂盒 50T/100T
PH0217 DNA病毒基因组提取试剂盒 50T/100T
PH0218 土壤基因组DNA提取试剂盒 50T/100T
PH0219 粪便基因组DNA提取试剂盒 50T/100T
PH9143 彗星法DNA损伤试剂盒 20T
PH0220 PCR/DNA纯化试剂盒 50T/100T
PH1420 PhyZol™ 总RNA提取试剂 50ml/100ml
PH0228 RNAplant 植物RNA提取试剂 50ml/100ml
PH0229 总RNA快速提取试剂盒（非离心柱型） 50T/100T
PH0230 RNA病毒基因提取试剂盒 50T/100T
PH0231 细菌RNA提取试剂盒 50T/100T
PH0232 动物组织/细胞总RNA提取试剂盒（离心柱型） 50T
PH0233 植物RNA提取试剂盒 50T
PH0234 血液RNA提取试剂盒 50T/100T
PH0235 RNA纯化试剂盒 20T
PH1592 线粒体DNA提取试剂盒 50T | 100T
PH1593 植物线粒体DNA提取试剂盒 50T | 100T
PH1496 PhyGet™ 柱式尿液DNA提取试剂盒 50T
PH1497 PhyGet™ 唾液DNA提取试剂盒 50T
PH1433 PhyGet™ 多糖多酚植物总RNA快速提取试剂盒（离心柱型） 20T/50T
PH1434 PhyGet™ miRNA快速提取试剂盒 50T
PH1435 PhyGet™ 全血miRNA快速提取试剂盒 20T/50T
PH1406 脱氧核糖核酸酶 I / DNase I 15KU
PH1407 DNase I (RNase free) 2000U
PH1408 DNA保存液 / DNA Preservation Solution 100ml/500ml
PH1409 盐酸胍溶液 (8mol/L,RNase free) 100ml
PH1410 异硫*酸胍溶液 (5mol/L,RNase free) 100ml
PH1411 十二烷基肌氨酸钠溶液 (10%,RNase free) 100ml
PH1412 盐酸胍 / Guanidine hydrochloride 100g / 500g
PH1413 异硫*酸胍 / Guanidine Thiocyanate 25g / 100g
PH1414 十二烷基肌氨酸钠 / Sodlum Lauroylsarcosine 25g / 100g
PH1415 DMSO (PCR级) 10ml
PH1416 AMV/MMuLV Buffer (10×,pH8.3) 10ml
PH1417 DNA退火缓冲液(5×) / Annealing Buffer for DNA Oligos(5×) 1ml
PH1418 PCR扩增缓冲液 / PCR Amplification buffer (10×,pH8.3) 10ml
PH1419 HBS缓冲液 / HBS buffer 500ml
PH0221 RNAwait（非冻型组织RNA保存液） 10ml/100ml
PH0222 RNAlong保存液 5ml/10ml
PH0224 5×RNA Loading Buffer（非变性） 1ml
PH0225 2×RNA Loading Buffer （变性） 1ml
PH1430 6×DNA上样缓冲液 / 6×DNA Loading Buffer 5×1ml/10ml
PH1431 10×DNA上样缓冲液 / 10×DNA Loading Buffer 5ml
PH1432 5×RNA上样缓冲液 / 5×RNA Loading Buffer 非变性 5ml
PH0226 0.1% DEPC处理水（DNase/RNase-free） 100ml/500ml