纤维素酶检测试剂盒（CellG3方法）
产品名称： 纤维素酶检测试剂盒（CellG3方法）
英文名称： Cellulase Assay Kit (CellG3 Method)
产品编号： K-CELLG3
产品价格： 0
产品产地： 爱尔兰
品牌商标： Megazyme
更新时间： null
使用范围： null
上海新睿生物科技有限公司
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纤维素酶测定试剂盒（CellG3方法）
用于测量内切纤维素酶（内切-1,4-β-葡聚糖酶）的CellG3测定试剂含有两种组分;
1）4,6-O-亚苄基-2-氯-4-**苯基-β-D-纤维三糖苷（BCNPG3）和2）热稳定的β-葡糖苷酶。亚苄基封闭基团防止β-葡萄糖苷酶对BCNPG3的任何水解作用。用内切纤维素酶培养产生非阻塞的色度测量寡糖，其被辅助β-葡糖苷酶迅速水解。因此2-氯-4-**苯酚的形成速率直接与内切纤维素酶水解BCNPG3有关。终止反应，加入Tris缓冲溶液（pH9.0）使苯酚盐显色。
请注意，现在有一种新的测定试剂盒（K-CellG5）可用于测量内切纤维素酶。 CellG5试剂含有一种纤维五糖核心，对某些纤维素酶显示出极大改进的灵敏度。此外，CellG3中的亚苄基封闭基团交换CellG5中的3-酮基 - 亚丁基会显着改善底物的水溶性，从而使测定中所需的DMSO浓度降低。由于已知DMSO抑制某些纤维素酶，这是使用CellG5的另一个好处。 Megazyme现在推荐使用K-CellG5来测量内切纤维素酶。
适用于自动/分析仪格式。
Colourimetric method for the determination of endo-1,4-β-
glucanase (cellulase) in enzyme preparations and fermentation
products
Principle:
(endo-1,4-β-glucanase)
(1) Benzylidene-G3-β-CNP + H2O → Blocked-GX + G(3-X)-β-CNP
(thermostable β-glucosidase)
(2) G(3-X)-β-CNP + H2O → D-glucose + CNP
(alkaline solution)
(3) CNP → phenolate ion (yellow colour)
Note: CNP = 2-Chloro-4-nitrophenol
Kit size: 180 / 360 assays / 720 (auto-analyser)
Method: Spectrophotometric at 400 nm
Total assay time: ~ 20 min
Detection limit: 0.05 U/mL
Application examples:
Fermentation broths, industrial enzyme preparations and biofuels research
Method recognition: Novel method
Note: The analogous fluorimetric reagent (R-CELLFLR)
is also available with 10-fold greater sensitivity.
Advantages
Very cost effective
All reagents stable for > 2 years after preparation
Completely specific for cellulase (endo-1,4-glucanase). The substrate is not hydrolysed by β-glucosidase, cellbiohyrolase or any other enzymes tested
Kinetic assays possible due to significant phenolate ion presence (and UV absorbance) at pH 5-6
Simple format. Well suited to automation
Standard included