cDNA文库构建
产品名称： cDNA文库构建
英文名称： cDNA文库构建
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产品价格： 10000
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cDNA文库构建
公司客服：010-58717636 业务QQ1 ：807475538 业务QQ2：2625721894
服务概述
我们拥有丰富的建库经验和成熟的实验方法，采用高质量的进口试剂和试剂盒, 为您的实验提供可靠的保证。在cDNA合成、连接及转化等方面拥有成熟的技术，建成的文库全长cDNA比例高，可用于筛选新基因及大规模基因测序。采用SMART建库技术，从微量的细胞中富集到足够克隆的cDNA且含有高比率的全长cDNA，经过连接以及高效电转化等步骤建立起具有代表性的cDNA文库。总 RNA抽提和mRNA纯化是最关键的第一步，必须保证mRNA的完整性和纯度。cDNA第一链长度太短或产量太低是cDNA文库构建中的常见问题。我们拥有专业的实验人员，能保证建成的文库插入片段平均长度≥1kb。建成的cDNA 文库的库容量可达到1×106pfu。
样品要求
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样品种类 |
样品要求 |
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动物、植物、微生物组织 |
请提供足量的新鲜样品：组织（2~3g），细胞（10 8）（4℃保存，不超过一天）或将新鲜样品立即存于液氮,或-80℃后保存不超过一个星期。 |
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RNA |
如要提供RNA，要求总RNA＞50μg（浓度＞0.3μg/μl）或mRNA＞2.5μg（浓度>0.3μg/μl）；最低总RNA量为2~3μg（浓度＞0.3μg/μl），最低mRNA量为0.2~0.3μg（浓度>30ng/μl）。OD260/OD280值为1.9~2.0，以我方电泳胶图、紫外分析仪定量为准。 RNA 的总量根据库容量不同会有所增加。 |
服务流程
提取总RNA，纯化mRNA，反转录合成cDNA第一链，通过引物延伸合成双链cDNA；或（材料有限的情况下）提取总RNA，反转录合成cDNA第一链，通过LD-PCR合成双链cDNA。然后将双链cDNA用SfiI酶切，连接到载体，转化或包装，扩增及保存。
完成时间
6~8周内完成。对于有些RNA难以抽提的材料或样品材料本身质量问题，时间较长，会在1周内和客户协商约定时间。
最终产品
1、产物电泳图谱；
2、初始库，保存在-20℃；
3、文库评价的数据，包括库容量，滴度，插入片段的平均长度，重组效率。库容量：初始文库的滴度在1 ×106 以上，重组效率大于90% ；如果需要扩增，保证扩增后滴度在109 左右，库容量大于1×105。插入片段平均长度据不同物种情况而定，植物或高等动物文库的插入片段大于1Kb。
服务费用
询价