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中性粒细胞提取

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产品名称: 中性粒细胞提取

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产品编号: XSL0002

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更新时间: 2023-08-24T09:59:18

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星森林(浙江)生物医学技术有限公司
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在瑞氏(Wright)染色血涂片中,胞质呈无色或极浅的淡红色,有许多弥散分布的细小的(0.2~0.4微米)浅红或浅紫色的特有颗粒。细胞核呈杆状或2~5分叶状,叶与叶间有细丝相连。其颗粒表面有一层膜包裹,可分1~4型,颗粒中含髓过氧化物酶(myeloperoxidase)、酸性磷酸酶、吞噬素(phagocytin)、溶菌酶、β葡糖苷酸酶、碱性磷酸酶等。中性粒细胞具趋化作用、吞噬作用和杀菌作用。

一、实验所需材料:

1、中性粒细胞分离液(histopaque)

2、全血

3、Hanks液

4、离心管若干

5、离心机

6、移液管,移液抢

二、实验步骤

1. 将所有试剂放至室温。

2、用离心管收集全血1-2ml

3、加等体积的Hanks液至全血中组成

4、加2ml中性粒细胞分离液至装至离心管中。

5、将全血和Hanks液加入分离液中

6、4℃,900r/min离心8-10min血液此时应该分为6层:血浆、单核细胞层、分离液、中性粒细胞、其余的分离液、红细胞 沉淀层。如果分层不是很明显,会导致分离的细胞不纯,则需要重复分离。

7、用吸管小心地移去上面的三层(血浆、单核细胞和分离液)

8、小心地吸取中性粒细胞层和其下面的分离液层,转移至一个干净的离心管中。

9、加Hanks液3ml,后4℃,900r/min离心8-10min,弃上清,留沉淀,重复2次。

10、如果细胞用来提RNA,可加Trizol 1ml保存。

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