腺病毒包装服务包括病毒载体构建和重组病毒包装。

一、客户提供信息：

◆ 客户具体需要的服务项目

◆ 所要表达的外源基因的名称，序列，客户如有现成的DNA模板可提供并提供电泳图片，图谱等相关信息

◆ 所要选择的穿梭载体

◆ 所需要表达的外源基因是否要带有融合标签，如果需要请选择需要的标签，并选择加入标签的位置

◆ 是否需要检测外源基因的表达，如需要请提供相应的抗体

◆ 所需要的病毒滴度及总量

◆ 病毒是否需要纯化

1.1 腺病毒包装服务特点：

1.1.1几乎可以感染所有类型的细胞。

1.1.2可以获得复制缺陷型 (E1和E3缺失) 的腺病毒。

1.1.3病毒滴度高，产生病毒经过浓缩后可以达到10¹² PFU/mL，能有效的进行增殖。

1.1.4腺病毒载体感染宿主的范围比较广，制备容易，操作简单.

1.1.5感染细胞时，不整合到染色体中，不存在激活致癌基因或插入突变等危险，生物安全性高。

1.2原理：

腺病毒 (Adenovirus，Ad) 是一种无包膜的线状双链DNA病毒，其复制不依赖于宿主细胞的分裂。有近50个血清型，大多数Ad载体都是基于血清型2和5，通过转基因的方式取代E1和E3基因，降低病毒的复制能力。这些重组病毒仅在高水平表达E1和E3基因的细胞中复制，因此是一种适用于治疗的高效控制系统。

1.3腺病毒包装简要流程 (以Invitrogen包装系统为例)

1.3.1含有目的基因的腺病毒RNAi干扰载体的构建和质粒纯化提取。

1.3.2采用PacI消化纯化的质粒。

1.3.3消化好的腺病毒表达载体转染293A细胞，收获细胞以制备病毒粗提液。

1.3.4将病毒粗提液感染293A细胞以扩增病毒。

1.3.5分装，- 80 ^oC保存。

1.3.6滴度测定。

1.4本公司提供的最终产品包括：

1.4.1重组后的腺病毒载体质粒以及测序图谱。

1.4.2产品无菌检测结果。

1.4.3腺病毒储液及相应的病毒滴度。

1.5我们保证：

1.5.1 制备的病毒颗粒携带片段的正确性2) 病毒颗粒的总数和病毒滴度：如无特殊要求1.5.2我们提供1mL滴度为1×10¹⁰ - 1×10¹²个病毒基因组 / mL的病毒储液。