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Bst3.0 DNA/RNA Polymerase

Bst3.0 DNA/RNA Polymerase

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产品名称: Bst3.0 DNA/RNA Polymerase

英文名称: Bst3.0 DNA/RNA Polymerase

产品编号: HZ3901A

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产品产地: 中国/上海

品牌商标: 沪震生物

更新时间: 2023-08-17T10:24:20

使用范围: null

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 Bst3.0 DNA/RNA Polymerase

描述:该制品系专为 RNA 样本的 LAMP 扩增反应设计, 制品中 Bst 4.0+ Polymerase 中包含 Bst 2.0 DNA 聚合 酶、 极其耐热 ThermoStable V 转录酶、Rnase Inhibitor,在 RNA LAMP 扩增中无需再加入任何其它 酶制品即可用于 RNA LAMP 扩增。除此外,Bst4.0+ DNA Polymerase 聚合酶中不含有甘油成分,因此可用于 建立 LAMP 引物 mix 与酶制品的冻干品,以提高 LAMP 检测制品的稳定性和易用性。 Bst 4.0+ Polymerase 可搭配不同的反应 Buffer 从而 实现不同的显色与检测方式。三种Buffer均已包含dNTP Mg 2+和相应的反应缓冲盐。其中 2xRed LAMP BufferD 用于红黄变色反应,扩增完毕后阳性样品为黄色,阴性样 品为红色;2xSG LAMP BufferD 包含 SYBR Green 染料 用于实时荧光检测;2xLAMP BufferD 用于浊度分析、浊 度仪或搭配 OG 橙绿变色反应管(阳性样本为绿色、阴性 样本为橙黄色,A3821)。 A3825 Bst4.0+ Polymerase (250 μl) A3825-01 2xRed LAMP BufferD (1 ml) A3825-02 2xLAMP BufferD (1 ml) A3825-03 2xSG LAMP BufferD (1 ml) 注意:Bst4.0+ Polymerase2.5μl 该制品包含 8U Bst2.0 DNA Polymerase20U ThermoStable V反转录酶、8U Rnase Inhibitor22%海藻糖,不含甘油,可用于冻干。 储存:长期保存于-20,可保存 2 年。短期保存置于 4 保存 3 个月,避免反复冻融。 使用方法: 1. 配制反应体系 0.2ml EP 反应管中加入下述试剂 2xLAMP BufferD 10 μl Bst4.0+ Polymerase 2.5 μl 10xLAMP Primer Mix 2 μl 模板 RNA X μl ddH2O 到总体积 20 μl 10xLAMP Primer Mix 浓度:FIP/BIP 分别为 16 μM LoopF/B 分别为 4 μMF3/B3 分别为 2 μM 2. 反应体系配好后,置于 60~68°C(首次实验采用 65°C 进行反应 20~45min 3. 引物及酶制品的冻干(可参考) Bst4.0+ DNA Polymerase 2.5 μl 10xLAMP Primer 2 µl 45%海藻糖 0.5 μl Total 5 μl 将该制品进行冻干处理,获得冻干品。 4. 冻干制品的 LAMP 扩增 向一份冻干品中加入 10 μl 2x Red LAMP BufferD 溶解冻 干制品,并加入最多 10 μl 的检测 RNA 模板(总体积为 20 μL) 进行 LAMP 扩增。 

与Bst 2.0 DNA 聚合酶和Bst DNA 聚合酶大片段相比,Bst 3.0 DNA/RNA 聚合酶具有更佳的等温扩增活性和更强的逆转录活性。无论以DNA还是RNA为模板,该酶都具有5’-3’的DNA聚合酶活性和强烈的链置换活性,但该酶5’-3’和3’-5’的外切酶活性缺失。 在以RNA为模板的LAMP实验中,可实现单酶系统反应。Bst 3.0 DNA/RNA 聚合酶在60-65度之间具有很好的反转录活性,可有效解决具有二级复杂结构的RNA模板的反转录,而Bst 2.0 DNA 聚合酶和Bst DNA 聚合酶大片段无此活性。

主要特征

  • 同时具有较强的延伸能力和逆转录活性
  • 耐热性能极强,对于复杂模板的扩增活性强
  • 强烈的链置换活性,可应用于LAMP检测

组分

组分名称 数量
Bst3.0 DNA/RNA Polymerase (8 U/μl) 200 μl/1 ml×2
10×Isothermo Buffer(Mg2+ free) 1.25 ml/20 ml
100mM Mg2+ 1 ml/20 ml

单位定义

一个活力单位即在65°C条件下,30分钟内催化10 nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。

应用

  • 恒温PCR扩增
  • DNA LAMP和RT-LAMP
  • 链置换基因合成
  • 在60-65℃之间具有反转录活性,可用于单管RT-PCR

储存

-20℃可保存3年。

本公司免费为客户设计LAMP引物,需要设计引物者请来信咨询

实例

LAMP实验

3173 LAMP实验

A:以pEasy质粒为模板,应用Bst3.0 DNA聚合酶和六对引物进行LAMP实验(65℃,30min),1-6分别为:模板0、5ng、2.5ng、1.5ng、1ng、0.5ng,M:DNA Marker2000;B:以140ng human RNA为模板,应用Bst3.0 DNA聚合酶和六对引物进行LAMP实验(65℃,30min),1-3:140ng human RNA为模板,4:不加模板,M:M:DNA Marker2000;

 

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