E.coli DNA聚合酶 Ι

产品及特点

大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ(DNA polymeraseⅠ，DNA polⅠ)，1956年由Arthur Kornberg首先发现的DNA聚合酶，又称Kornber酶。纯化的DNA polⅠ由一条多肽链组成，约含1000个氨基酸残基，分子量为109KD。含有一个二硫键和一个-SH基。它具有下列特点：

1. 除具有5→3DNA聚合酶功能，还具有5→3外切酶活性，3→5外切酶活性，焦磷酸解作用和焦磷酸交换作用。

2. 可应用于切口平移(Nick-translation)和cDNA第二链合成。

3. 本品不含 DNase I，因此切刻平移反应时需额外添加 DNase I。

分子结构

反应条件

1X Buffer [10 mM Tris-HCl，50 mM NaCl，10 mM MgCl2，1 mM DTT(pH 7.9 @ 25℃) ]。加入 dNTPs (不随酶提供) 。

Buffer成分

25 mM Tris-HCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，50% Glycerol，pH 7.4 @25℃

参考文献

(1) Lehman, I.R. （1981）. In P.D. Boyer （Ed.）, The Enzymes Vol 14A,（pp.16–38）. San Diego: Academic Press.

(2) Murray, N.E. and Kelley, W.S. （1979）Molec. Gen.Genet., 175, 77–87.

(3) Meinkoth, J. and Wahl, G.M. （1987）. In S.L. Berger and A.R. Kimmel（Eds.）, Methods in Enzymology Vol.152, （pp. 91–94）. San Diego:Academic Press.

(4) Gubler, U. and Hoffmann, B.J. （1983） Gene, 25, 263–269.

(5) D´Alessio, J.M. and Gerard, G.F. （1988） Nucleic Acids Res., 16,1999–2014.