ImagenFect RNAi（IR）转染试剂使用说明

浓度：4 μM 

储存条件：4℃，长期保存建议-20℃

转染实验结束后即可观察荧光示踪，IR荧光永久、稳定

简介

IR试剂用于转染，能够将具有生物学功能的核酸或多肽转移运送到特定细胞内，并使其在细胞内维持生物功能。其中核酸包括DNA（质粒和线性双链DNA）、siRNA（用于RNAi）。转染技术已广泛应用于基因组功能研究（基因表达调控、基因沉默、信号转导和药物筛选）和基因治疗研究。

用转染试剂作为基因载体进行转染，是目前主要的转染方法，阳离子脂质体试剂是目前主要的转染试剂，但由于其转染效率低、细胞毒性高、不耐血清、不适宜体内转染等缺点限制了其应用范围。理想的基因转染试剂应该具有如下特点：(1) 高效转染；(2) 低细胞毒性；(3) 易于观察、检测；(4) 方法简单、安全；(5) 省时、经济。

ImagenFect RNAi是2010年4月纳奥生物全球首发的siRNA荧光转染试剂，也可转染DNA、多肽等生物分子，它具有高效、低毒、荧光示踪、耐血清、易靶向修饰、适合体内外转染等诸多优势。

IR分子为纳米复合材料，分子量约100kD，其作用机理为纳米粒子携带目的基因通过细胞内吞作用进入细胞，并有效促进目的基因-IR复合体从细胞内溶酶体(endosome)的释放，以及目的基因在细胞内的有效释放。IR分子最终被分解排出细胞外，可用荧光显微镜观察转染过程。

在合理操作及良好实验条件的前提下，IR能达到90%以上细胞转染效率（即超过90%细胞被成功转染）。

1.      适用范围

IR适用于RNA、DNA在各类肿瘤细胞及常规细胞系如CHO、Hela、293T、Jurkat等细胞的转染。

2.      细胞培养

按照表1推荐的细胞数量和培养基量，提前一天将细胞种植在培养容器中。转染时细胞汇合度在50%-80%可以达到最佳转染效率，如果追求比较好的荧光图片，可在30%-40%进行转染。（由于本品细胞毒性较小，可采用较小的细胞汇合度，更适合转染后的观察）

表1 细胞接种数量、培养液体积、IR用量推荐