说明

由细菌抗药基因编码的氯霉素转乙酰基酶(chloramphenicol acetyltransferase, CAT) 通过将氯霉素的一个或两个羟基乙酰化而使其失活。在真核生物中没有发现此基因，因而真核细胞没有CAT 活性背景。Promega 的CAT Enzyme Assay System 可以用两种方法监控被转染细胞中CAT 酶的活性：液闪记数法(LSC) 和薄层层析法(TLC)；可以对同一细胞提取物进行LSC 或TLC 检测。TLC 检测方法比LSC检测方法灵敏度低且费时，但可直观地对检测结果进行确认。TLC 反应产物需要通过放射自显影或磷酸成像分析来检测。

由细菌抗药基因编码的氯霉素转乙酰基酶(chloramphenicol acetyltransferase，CAT)，催化乙酰辅酶A 上的乙酰基团转移至氯霉素3` 位的羟基上。该酶可作为CAT 检测中细胞粗提物的标准品，在37℃ 1 分钟内将1nmol 的丁酸或乙酸转移至氯霉素上所需要的酶量称为1 个单位。

丁酰辅酶A 也适用于氯霉素转乙酰基酶的反应。通过CAT 酶反应可将丁酰基团转移至氯霉素上，并可通过液闪记数法或薄层层析法检测酶的活性。

. 快速：2-3 小时内完成检测。

• 线性：LSC 检测酶活性线性范围是3 个数量级。

• 灵敏：最低至3x10^-4 单位(2pg) 的CAT 可被检测。

• 耐用：报告基因裂解缓冲液允许对同一细胞提取物同时进行萤光素酶、CAT 和β- 半乳糖苷酶的检测。