琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒北京索莱宝科技有限公司

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性能参数

产品名称: 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒
英文名称: 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒
产品货号: D1200
产品规格: 50T/100T
产品产地: solarbio
产品商标: solarbio
价    格: 150/280元
保存与运输: 2-8℃
现货状态: 现货
产品资料: 实验方法技术资料
更新时间: 2019/10/15 13:41:00
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诚信指数:1321点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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产品详细描述

琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒

保存:常温干燥保存,复检期为一年。 

试剂盒组成

D1200-50T

D1200-100T

溶胶液

50ml

100ml

漂洗液

15ml

15ml×2

洗脱液

15ml

30ml

吸附柱

50

100

收集管

50

100

说明书

1

1

产品说明: 

      本试剂盒采用可以高效、专一结合的 DNA硅基质材料和独特的缓冲液系统,从 TAE或 TBE 琼脂糖凝胶上回收 DNA 片段,同时除去蛋白质、其他有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。可回收 100bp-10kb大小的片段,回收率大于 80%(小于 100bp 和大于 100kb 的 DNA 片段回收率为 30-50%)。使用本试剂盒回收的 DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等试验。 

注意事项:

在使用本试剂盒前请阅读此注意事项。 

1.  电泳前*好更换成新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。 

2.  如下一步实验要求较高,则应尽量使用 TAE 电泳缓冲液。 

3.  切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对 DNA造成损伤。 

4.  回收小于 100bp 和大于 100kb 的DNA 片段时,应加大溶胶液的体积,延长吸附和洗脱的时间。 

5.  回收率与初始 DNA 量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越小,回收率越低。 

6.  如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。 

操作步骤:

(使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。) 

1、琼脂糖凝胶电泳后,将单一的目的 DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分) ,放入干净的离心管中,称取重量。 

2、向胶块中加入 3 倍体积溶胶液(如果凝胶重为 0.1g,其体积可视为 100ul,则加入300ul 溶胶液) ,50-55℃水浴放置 10min,期间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解。 

注意:溶胶时,如果溶胶液变为红色(正常情况下为淡黄色) ,可向含有 DNA 的胶溶液中加入 10-30ul 3M 醋酸钠(pH5.2)将胶溶液调为淡黄色,否则将会影响 DNA 与吸附柱的结合,影响回收效率。 

3、将上一步所得溶液加入一个吸附柱中(吸附柱放入收集管中) ,12000rpm 离心 30-60 秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放入收集管中。 

注意:胶块完全溶解后*好将胶溶液温度降至室温再上柱,因为吸附柱在较高温度时结合 DNA 的能力较弱。 

4、向吸附柱中加入 700ul 漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心 1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。 

5、向吸附柱中加入 500ul 漂洗液,12000rpm 离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。 

6、12000rpm离心 2min,尽量除去漂洗液。将吸附柱敞口置于室温或 50℃温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,防止漂洗液中的乙醇影响后续的实验。 

7、将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加适量经 65℃水浴预热的洗脱液,室温放置 2min,12000rpm 离心1min。 

注意:

1)、为了增加回收效率,可将得到的洗脱液重新加入吸附柱中,12000rpm再次离心 1min。 

2)、洗脱缓冲液体积不应少于 30ul,体积过小影响回收效率。 

3)、洗脱液的 pH 值对于洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其 pH 值在 7.0-8.5 之间。 

8、DNA 产物-20℃保存。   

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北京索莱宝科技有限公司目前备有现货1500种,当天即可发货,可以满足大部分高等院校以及高级研究所的实验要求,同时省去您焦急等待的时间。欢迎前来咨询。

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