酵母质粒提取试剂盒北京索莱宝科技有限公司

金牌供应商

性能参数

产品名称: 酵母质粒提取试剂盒
英文名称: 酵母质粒提取试剂盒
产品货号: d1160
产品规格: 50T/100T
产品产地: solarbio
产品商标: solarbio
价    格: 280/480元
保存与运输: 2-8℃
现货状态: 充足
产品资料: 实验方法技术资料
更新时间: 2020/2/19 15:33:00
浏览人数:3432
诚信指数:1375点
了解更多:进入公司展台
使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
点此求购
在线QQ: 我是2748554845,请问我有什么可以帮到您呢?
生物在线声明:以上所展示的信息由企业自行提供,内容的真实性、准确性和合法性由发布企业负责。生物在线对此不承担任何保证责任。

供应商联系卡

北京索莱宝科技有限公司
地址:
北京市通州区马驹桥镇联东U谷景盛南四街15号85A三层
邮编:
101102
电话:
010-56371250
传真:
010-56371281
联系人:
马金成
所在区域:
北京·北京
邮件:
公司展台:
在线QQ:
我是2748554845,请问我有什么可以帮到您呢?

产品详细描述

酵母质粒提取试剂盒
产品简介: 
试剂盒采用酶法破碎酵母细胞壁和碱裂解法裂解酵母细胞来提取酵母质粒 DNA。所采用的酵母破壁酶能有效地破坏酵母细胞壁,提高酵母质粒 DNA 的产量。吸附柱中采用的硅基质材料能高效、专一地附 DNA,可*大限度去除杂质蛋白质及细胞中其他有机化合物。使用本试剂盒提取的酵母质粒DNA可适用于各种常规的分子生物学实验,包括酶切、PCR、测序、连接和转化等试验。本试剂盒无需使用酚、氯仿等有毒试剂,操作安全。 
操作步骤: 
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。溶液YP1在使用前先加入RNaseA(将试剂盒中提供的 RNaseA全部加入),混匀,置于 2-8℃保存。如非指明,所有离心步骤均为使用台式
离心机在室温下离心。 
1、取1-5ml酵母培养物(不超过 5×107cells),12000rpm离心 1min,尽量吸除上清(菌液较多时可以通过多次离心将菌体沉淀收集到一个离心管中)。 
2、酵母细胞壁的破除: 
A、酶法:向酵母菌体中加入 470ul 山梨醇 Buffer,充分悬浮菌体,加入 25ul 酵母破壁酶和 5ul β-巯基乙醇,充分混匀,30℃处理 1-2h,期间可颠倒离心管混匀数次。12000rpm 离心 1min,弃上清,收集沉淀。向沉淀中加入 250ul 溶液 YP1(请先检查是否已加入 RNaseA) ,充分悬浮沉淀。注意:如果菌块未彻底混匀,会影响裂解导致质粒提取量和纯度偏低。 
B、玻璃珠法:向酵母菌体中加入 250ul 溶液 YP1(请先检查是否已加入 RNaseA) ,充分悬浮沉淀。加入 150-200ul酸洗玻璃珠(自备),漩涡振荡 10min。简短离心使玻璃珠沉降到离心管底,吸取上清(如上清有所损失,请用溶液 YP1 补足至 250ul)于另一干净离心管中。 
3、向离心管中加入 250ul溶液 YP2,温和地上下翻转 6-8 次使菌体充分裂解。注意:混匀一定要温和,以
免污染细菌基因组 DNA,此时菌液应变得清亮粘稠,作用时间不要超过 5 min,以免质粒受到破坏。 
4、向离心管中加入 350ul溶液 YP3,立即温和地上下翻转 6-8次,充分混匀,此时会出现白色絮状沉淀。12000rpm离心 10 min,用移液器小心地将上清转移到另一个干净的离心管中,尽量不要吸出沉淀。注意:溶液 YP3 加入后应立即混合,避免产生局部沉淀。如果上清中还有微小白色沉淀,可再次离心后取上清。 
5、将上一步所得上清液加入吸附柱中,室温放置 2min,12000rpm 离心 1min,倒掉收集管中的废液,吸附柱重新放回收集管中。 
6、向吸附柱中加入 700ul 漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm 离心 1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。 
7、向吸附柱中加入 500ul漂洗液,12000rpm离心 1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。 
8、12000rpm 离心 2min,将吸附柱敞口置于室温或 50℃温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR 等。 
9、将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加 50-200ul 经 65℃水浴预热的洗脱液,室温放置 2min,12000rpm离心 1min。 
10、为了增加质粒的回收效率,可将得到的洗脱液重新加入吸附柱中,室温放置 2min, 12000rpm离心 1min。  
注意事项: 
1、使用前请先检查溶液 YP2 和溶液 YP3 是否出现混浊,如有混浊现象,可在 37℃水浴中加热几分钟,待溶液恢复澄清后再使用。 
2、洗脱缓冲液体积不应少于 50ul,体积过小影响回收效率;洗脱液的 pH值对洗脱效率也有影响,若需要用水做洗脱液应保证其 pH 值在 8.0 左右(可用 NaOH 将水的 pH 值调至此范围),pH 值低于 7.0 会降低。洗脱效率;DNA产物应保存在-20℃,以防 DNA降解。 
3、质粒得率与酵母菌株、质粒拷贝数、培养条件等因素有关。通常酵母质粒拷贝数都很低,一般通过电泳或分光光度计法都很难检测到,可通过 PCR或转化大肠杆菌来检测。 
4、DNA浓度及纯度检测:得到的基因组DN**段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DN**段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。DNA应在OD260处有显著吸收峰, OD260值为 1 相当于大约 50  μg/ml双链DNA、40  μg/ml单链DNA。OD260/OD280比值应为1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水,比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。 
相关试剂: 
  R1020    酵母破壁酶溶液 
  D1900    酵母基因组 DNA提取试剂盒 
  T1060    50×TAE 缓冲液 
  G8142    GoldView II 型核酸染色剂(5000×) 
  E1020    EB染色液 

相关试剂盒

D1100 质粒小量提取试剂盒 50T/100T 120/160
D1110 质粒大量提取试剂盒 10T 300
D1120 革兰氏阳性菌质粒小量提取试剂盒 50T/100T 180/230
D1130 革兰氏阳性菌质粒大量提取试剂盒 10T 380
D1140 无内毒素质粒小量提取试剂盒 50T/100T 280/380
D1150 无内毒素质粒大量提取试剂盒 10T 420
D1160 酵母质粒提取试剂盒 50T/100T 280/480
D1200 琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒 50T/100T 150/280
D1250 聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒  20T/50T  240/520
D1300 DNA产物纯化试剂盒 50T/100T 150/280
D1500 植物基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 400/700
D1600 细菌基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 400/700
D1700 动物组织/细胞基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 400/700
D1800 全血基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 400/700
D1850 全血基因组DNA提取试剂系统 50T/200T 360/960
D1900 酵母基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 400/700
D2100 通用基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 400/700
D2300 真菌基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 500/850
D2400 DNA病毒基因组提取试剂盒 50T/100T 400/700
D2600 土壤基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 680/1200
D2700 粪便基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 400/700
R2000 RNA病毒基因组提取试剂盒 50T/100T 700/1180

       北京索莱宝科技有限公司目前备有现货1500种,当天即可发货,可以满足大部分高等院校以及高级研究所的实验要求,同时省去您焦急等待的时间。欢迎前来咨询。

生物在线声明:以上所展示的信息由企业自行提供,内容的真实性、准确性和合法性由发布企业负责。生物在线对此不承担任何保证责任。

查看 酵母质粒提取试剂盒 产品的用户还对以下产品感兴趣

  MolPure® Endo-free Plasmid Maxi Kit 无内毒素质粒大量提取试剂盒  [供应商:上海翊圣生物科技有限公司]
  MolPure® Plasmid Mini Kit 质粒小量提取试剂盒  [供应商:上海翊圣生物科技有限公司]
  Biomiga试剂盒秋季促销  [供应商:上海新睿生物科技有限公司]
  【正品直销,售后保障】(质粒小提试剂盒)FastPure Plasmid Mini Kit  [供应商:南京诺唯赞生物科技有限公司]
  无内毒素质粒中量提取试剂盒  [供应商:上海同科生物科技有限公司]
  无内毒素质粒小量提取试剂盒  [供应商:上海同科生物科技有限公司]
  质粒DNA抽提试剂盒  [供应商:盘古基因生物工程(南京)股份有限公司]
  质粒小量提取试剂盒(柱纯化法)  [供应商:上海同科生物科技有限公司]
  Omega 99.8%盐酸胍(500g)   [供应商:上海延慕实业有限公司]
  Omega Carrier RNA 1mg   [供应商:上海延慕实业有限公司]

ADVERTISEMENT

找不到您所需的产品,发布求购试试?

标题:*
描述:
姓名:*
Email:*
单位:*
电话:*
地址:*
邮编:
资料: 需要 不需要
报价: 需要 不需要