各种动物脊髓干细胞分离液试剂盒北京索莱宝科技有限公司

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性能参数

产品名称: 各种动物脊髓干细胞分离液试剂盒
英文名称: 各种动物脊髓干细胞分离液试剂盒
产品货号: 各种动物脊髓干细胞分离液试剂盒
产品规格: 100ml×3/kit
试剂级别: 色谱级
产品产地: 北京索莱宝
产品商标: solarbio
价    格: 0.00元
保存与运输: 室温储存,有效期至少12个月
产品资料: 资料下载
更新时间: 2019/7/5 17:47:00
浏览人数:1102
诚信指数:1277点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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北京索莱宝科技有限公司
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产品详细描述

 各种动物脊髓干细胞分离液试剂盒

规格:100ml×3/kit
保存:室温储存,有效期至少12个月。
试剂盒内容:
试剂:全血及组织稀释液 100ml
试剂:细胞洗涤液 100ml
试剂C 100ml
试剂E 100ml
试剂F 100ml
说明书 1 份
一、 各种动物骨髓细胞的采集方法
1. 大鼠、小鼠骨髓的采集:用颈椎脱臼法处死动物,剥离出胸骨或股骨,用注射器吸取少量的F 液,冲洗出胸骨或股骨中全部骨髓液,以500g(约1800 转/分)离心20 分钟,弃上清。沉淀以F 液重复洗涤一次后用全血及组织稀释液悬起(细胞浓度为2×108-1×109个/ml),备用。
2. 大动物骨髓的采集:
A.骨髓穿刺点定位
(1)胸骨:穿刺部位在胸骨中线,胸骨体与胸骨柄连接处,或选胸骨上1/3 部。
(2)胫骨:穿刺部位在胫骨内侧,胫骨上端的下方1 厘米处。
(3)肋骨:穿刺部位在第5~7 肋骨各自的中点上。
(4)髁骨:穿刺部位在髁前上棘后2~3 厘米的髁嵴。
(5)股骨:穿刺部位在股骨内侧面,靠下端的凹面处。
B.骨髓穿刺方法
(1)实验动物按要求固定,穿刺部位去毛、消毒、麻醉,要求局部麻醉范围直达骨膜,也可作全麻。
(2)操作人员带消毒手套,确定穿刺点,估计从皮肤到骨髓的距离并依此固定骨髓穿刺针长度。左手拇、食指绷紧穿刺点周围皮肤,右手持穿刺针在穿刺点垂直进针,小弧度左右旋转钻入,当有落空感时表示针尖已进入骨髓腔。用左手固定穿刺针,右手抽出针芯,连接注射器缓慢抽吸骨髓组织,当注射器内抽到少许骨髓时立即停止抽吸,收集骨髓细胞加入4-5ml F 液混匀,以500g(约1800 转/分)离心20 分钟,弃上清,沉淀以F 液重复洗涤两次后用全血及组织稀释液悬起(细胞浓度为2×108-1×109 个/ml),备用。
(3)左手压住穿刺点周围皮肤,迅速拔出穿刺针,用棉球压迫数分钟。如穿刺的是肋骨,除压迫止血外,还需胶布封贴穿刺点,防止发生气胸。
二、骨髓干细胞分离方法
1.取 1ml 骨髓细胞悬液(制备方法详见“一、各种动物骨髓细胞的采集方法”)与E 液按1:1比例混合再与1 份全血及组织稀释液混匀置20℃±2℃下自然沉降20-30 分钟。吸取浑浊的上清部分,弃去底部红细胞备用。
2. 吸取浑浊的上清部分液体小心叠加在C 液之液面上(比例为1:1),20℃±2℃,400g(约1500 转/分),离心20 分钟(半径15cm 水平转子)。
此时离心管中由上至下细胞分四层。第一层;为稀释液层。第二层;为环状乳白色含所需干细胞层。第三层;为透明分离液层。第四层;为极少红细胞层。收集第二层细胞放入含细胞洗涤液4-5 毫升的试管中,充分混匀后,以500g(约1800 转/分)离心20 分钟。沉淀经反复洗涤2 次即得所需干细胞。
注: 提取率大于80%。
三、 注意事项
A. 本分离液是敏光型的,在运输和贮藏过程中应在18℃-25℃避光保存,启封后置4℃保存避免微生物污染。另外,本品为真空包装,未启封前置于10℃ 以下易出现白色结晶,影响分离效果。
B. 待分离的样本要求新鲜,避免冷冻和冷藏。分离液和所分离样本一定在20℃水浴箱中复温20 分钟保证分离液和所分离样本温度在20℃±2℃时分离效果*好,且所有操作过程一定要在无菌条件下进行。
C. 由于各品牌离心机的性能不同,国内南北地区温度环境和四季的差异,可能影响分离效果,用户可以调节离心转数,调节离心的时间,摸索*佳的分离条件(具体分离条件各实验室自定)。
D. *好使用无静电反应的离心管,推荐使用未经过碱处理的玻璃离心管。
四、产品性能指标
pH 7.0-7.5
渗透压 280-340mOsmol/kg
内毒素 ≤0.5EU/ml
无菌 直接接种培养14 天后培养基澄清
澄明度及不溶性颗粒物 每50ml 溶液中含10μm 以上的不溶性微粒20 粒以下,
含25μm 以上的不溶性微粒5 粒以下
五、贮藏及保存期限
18℃-25℃避光保存,有效期两年。启封后置4℃保存,有效期一周。
注:若保证无微生物污染,启封后可置4℃长期保存。但应注意保存温度较低时本分离液易
出现白色结晶,影响分离效果。
 

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