
15596-026 Trizol Reagent一步法总RNA提取试剂 100ml 核酸纯化
产品名称: 15596-026 Trizol Reagent一步法总RNA提取试剂 100ml 核酸纯化
英文名称: Trizol Reagent
产品编号: 15596-026
产品价格: 0
产品产地: 美国
品牌商标: Invitrogen
更新时间: null
使用范围: null
上海联硕生物科技有限公司
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Trizol Reagent
简介 :TRIzol 是一种新型总 RNA 抽提试剂,可以直接从细胞或组织中提取总 RNA 。其含有苯酚、异硫*酸胍等物质,能迅速破碎细胞并抑制细胞释放出的核酸酶。
TRIzol 在破碎和溶解细胞时能保持 RNA 的完整性,因此对纯化 DNA 及标准化 RNA 的生产十分有用。
TRIzol 的成分 :
TRIzol 的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解细胞,使细胞中的蛋白,核酸物质解聚得到释放。苯酚虽可有效地变性蛋白质,但不能完全抑制 RNA 酶活性,因此 TRIzol 中还加入了 8 -羟基喹啉、异硫*酸胍、 β- 巯基乙醇等来抑制内源和外源 RNase ( RNA 酶)。
TRIzol 的主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解细胞,使细胞中的蛋白,核酸物质解聚得到释放。苯酚虽可有效地变性蛋白质,但不能完全抑制 RNA 酶活性,因此 TRIzol 中还加入了 8 -羟基喹啉、异硫*酸胍、 β- 巯基乙醇等来抑制内源和外源 RNase ( RNA 酶)。
※ 0.1% 的 8 -羟基喹啉可以抑制 RNase ,与氯仿联合使用可增强抑制作用。
※ 异硫*酸胍属于解偶剂,是一类强力的蛋白质变性剂,可溶解蛋白质并使蛋白质二级结构消失,导致细胞结构降解,核蛋白迅速与核酸分离。
※ β- 巯基乙醇的主要作用是破坏 RNase 蛋白质中的二硫键。
TRIzol 的使用方法 :
用匀浆器将组织磨碎,加入 TRIzol 处理组织。 5 分钟后加入氯仿,以每分钟 12000 转离心 5 分钟,样品即分成水样层、中间层和有机层。
用匀浆器将组织磨碎,加入 TRIzol 处理组织。 5 分钟后加入氯仿,以每分钟 12000 转离心 5 分钟,样品即分成水样层、中间层和有机层。
※ RNA 存在于水样层中,收集水样层后可以通过异丙醇沉淀 RNA 来还原。
※ 在除去水样层后,有机层中的 DNA 和蛋白质也能相继以沉淀的方式还原:乙醇能使中间层的 DNA 沉淀析出,在有机层中加入异丙醇能沉淀出蛋白质。
每 100ml TRIzol 可以抽提 100 个六孔板中的样品或 100 个 50-80mg 的组织样品。无论样品是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织 (50-100mg) 和细胞 ( 约五百万个 ) 及大量的组织 (≥1g) 和细胞 ( 超过一千万个 ) 均有较好的分离效果。
每一百万细胞用 TRIzol 抽提可得 5-15 微克 RNA ,每毫克组织用 TRIzol 抽提可得 1-10 微克 RNA (产量因细胞和组织不同而异)。
TRIzol 操作上的简便性允许其同时处理多个样品,所有的操作可以在一小时内完成。
TRIzol 抽提的总 RNA 能够避免 DNA 和蛋白质的污染,故而能够作 RNA 印迹分析、斑点杂交、 poly(A)+ 选择、体外翻译、 RNA 酶保护分析和单分子克隆( PCR )。
※ 如果是用于 PCR ,当两条引物位于单一外显子内时,建议用级联扩大的 DNase I(Cat. No. 18068) 来处理抽提的总RNA 。
※ TRIzol 试剂能促进不同种属、不同分子量大小的多种 RNA 的析出。例如,从大鼠肝脏抽提的 RNA 经过琼脂糖凝胶电泳并用溴化乙啶染色,可见许多介于 7kb 和 15kb 之间的不连续的高分子量条带( mRNA 和 hnRNA 成分),两条优势核糖体 RNA 条带位于 ~5 kb (28S) 和 ~2 kb (18S) ,低分子量 RNA 介于 0.1 和 0.3kb 之间 (tRNA, 5S) 。当抽提的 RNA 用 TE稀释时,其 A260/A280 比值 ≥1.8 。抽提小 RNA 时宜 -70 ℃ 沉淀过夜。
TRIzol 对人体有害,使用时应戴一次性手套,注意防止溅出。
Invitrogen 一步法总RNA提取试剂/Trizol Reagent
使用Invitrogen公司的TRizol试剂,可快速简单地获得高纯度总RNA。
Invitrogen 公司的一步法总RNA提取试剂TRIZOL比其他纯化方法可提高产率30%-150%。这种TRIZOL试剂的酚和异硫*酸胍的均相溶液可直接用于从人类、动物、植物、细菌等的细胞或组织中提取总RNA、DNA或蛋白质。
TRIZOL 试剂纯化的RNA可用于PCR、RNA印迹分析、poly(A)+筛选或斑点杂交。纯化的DNA和蛋白质分别适用于DNA和蛋白质印迹分析。
◆ 获得高纯度RNA(A260/A280>1.9)
◆ 在1小时内分离RNA;在3小时内分离DNA或蛋白质
◆ 鲜明的红色染料使去除含RNA的液相简单便捷
◆ 无论是小量的细胞(5×106)或组织(50-100mg)还是大量的细胞(107)或组织(>1g)都可得到出色的结果
◆ 在4℃条件下可稳定保存两年以上
◆ 可使用TRIZOL用于组织或细胞;使用TRIZOL LS用于血液或其他液体样品
◆ 获得高纯度RNA(A260/A280>1.9)
◆ 在1小时内分离RNA;在3小时内分离DNA或蛋白质
◆ 鲜明的红色染料使去除含RNA的液相简单便捷
◆ 无论是小量的细胞(5×106)或组织(50-100mg)还是大量的细胞(107)或组织(>1g)都可得到出色的结果
◆ 在4℃条件下可稳定保存两年以上
◆ 可使用TRIZOL用于组织或细胞;使用TRIZOL LS用于血液或其他液体样品
品名 : TRIzol Reagent
Cat. No . 15596-026
TRIzol® Reagents are ready-to-use, monophasic solutions of phenol and guanidine isothiocyanate suitable for isolating total RNA, DNA, and proteins (1-6). Isolation procedures are based upon improvements to the single-step RNA isolation method
General Specifications
Brand
|
TRIzol®
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Final Product
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Transcriptome RNA
micro RNA
Total RNA
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High Throughput Compatibility
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Manual Protocols
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Isolation Technology
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Organic Extraction
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Number of Reactions
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100 Preps
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Product Size
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100 ml
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Purification Time
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1 hr
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Quantity
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1
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Sample Type (General)
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Viral Samples
Plant Samples
Tissue
Blood
Bacteria
Yeast
Cells
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Scale
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Scaleable
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Starting Material (Cell #)
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Up to 1g Tissue, Up to 1 x 10^7 cells
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System
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TRIzol
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Yield (up to)
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8 mg
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Top Contents & Storage:
TRIzol® and TRIzol® LS Reagents include the indicated amount of reagent. The TRIzol® Max™ Bacterial RNA Isolation Kit contains TRIzol® Reagent and Max Bacterial Enhancement Reagent. Store at 2°C to 8°C.