Aureobasidin A(AbA)金担子素A上海翊圣生物科技有限公司

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性能参数

产品名称: Aureobasidin A(AbA)金担子素A
英文名称: Aureobasidin A(AbA)金担子素A
产品货号: 60231ES03
产品规格: 1mg
产品产地: YEASEN
产品商标: YEASEN
价    格: 1366元
保存与运输: 4℃
产品资料: 实验方法技术资料
更新时间: 2019/9/16 8:46:00
浏览人数:473
诚信指数:889点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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产品详细描述

Aureobasidin AAbA)金担子素A

产品信息

产品名称

产品编号

规格

储存

价格(元)

Aureobasidin AAbA)金担子素A

60231ES03

1mg

4

1366.00

Aureobasidin AAbA)金担子素A

60231ES08

5×1mg

4

4266.00

Aureobasidin AAbA)金担子素A

60231ES10

10×1mg

4

7676.00

产品描述

金担子素AAureobasidin AAbA)是从丝状真菌Aureobasidium pullulans No. R106中分离出来的环酯肽类抗生素,具有很强的抗真菌能力。在较低的浓度下(0.1-0.5 μg/ml)即可对酵母产生毒性。对其敏感的真菌种类包括:出牙酵母(Saccharomyces cerevisiae)、粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)、光滑念珠菌(Candida glabrata)、构巢曲霉(Aspergillus nidulans)和黑曲霉(A. niger.)。作用机制在于AbA抑制了真菌生长所依赖的肌醇***酰胺(inositol phosphorylceramideIPC)合成酶的活性,干扰鞘脂合成,从而进一步杀死菌株。编码IPC合成酶的基因研究较多的有来自酿酒酵母菌的AUR1 基因,以及构巢曲霉的AURA基因,两者具有同源性。通过对这些编码基因进行突变即可使得菌株对AbA产生抗性,如AUR1-C基因。

AbA非常适合用作阳性克隆子筛选用的药物选择性标记。AbA抗性也是酵母单/双杂交研究中理想的报告子。本品为溶于甲醇的AbA溶液,浓度为1 mg/ml。具体的工作浓度取决于宿主细胞的敏感度(见表1. AbA对各种酵母菌的最低抑菌浓度(MIC))。

 产品性质

分子式(Formula

C60H92N8O11

分子量(Molecular weight

1100

纯度(Purity

95%

熔点(Melting point

155-157

结构式(Structure

运输和保存方法

冰袋运输。4℃保存。 

操作步骤(抗AbA的酵母转化系统)

1)加入0.5 ml过夜培养的酵母到50 ml YPD培养基中(配方:1L液体培养基含有10g yeast extract20g polypeptone 20g D-glucose;固体培养基另外加入2%琼脂;)。

230℃培养约6小时,测定OD66012。使用二倍体时,测定OD66024

31,000×g离心5分钟。

4)用10 ml Solution A(配方:100 mM Lithium acetate10 mM Tris-HCl pH 7.51 mM EDTA)悬浮沉淀,1,000×g离心5分钟。

5)用Solution A重悬沉淀,直到OD660150

6)在管内分取100 μl细胞悬浮液,30℃培养1小时。

7)加入5 μg载体(环状或线性DNA)和150 μg Carrier DNA(已经过100℃加热10分钟,并迅速冷却)。

   

    【注】:pAUR101需使用线性DNA进行转化。使用环状DNA会降低转化效率甚至转化不成功。pAUR112pAUR123需使用完整的质粒DNA进行转化。

8)加入850 μl Solution B(配方:取40 g Polyethylene Glycol 4000溶于100 ml Solution A充分溶解,需要现用现配),轻轻混匀。

930℃培养30分钟后,42℃培养15分钟。

10)室温放置10分钟。

115,000 rpm离心1分钟,用5 ml YPD培养基悬浮沉淀。

1230℃培养6小时~过夜。

135,000~10,000 rpm离心,用1-10 ml 0.9% NaCl悬浮沉淀。

14)在YPD选择培养基平板(含有一定浓度的AbA,依菌株类型而定)上接种100 μl细胞悬液。30℃培养3-4天后转化完成。

15)挑取阳性转化子,和/或测定转化效率(以每微克质粒DNA转化的菌落数来表示)。

注意事项

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2AbA的最佳工作浓度因宿主细胞不同而有差异,可根据最低抑菌浓度(MIC)来确定。

1 Aureobasidin 对各种酵母菌的最低抑菌浓度

菌株

MICμg/ml

S.cerevisiae

ATCC9763diploid

0.2-0.4

SH3328haploid

0.1

Sake yeastdiploid

0.1-0.2

Shochu yeastdiploid

0.1

Beer yeasttriploid or tetraploid

0.1

Baker’s yeastdiploid

0.2-0.4

Schizo.pombe

JY-745monoploid

0.1

C.albicans

TIMM-0136diploid

0.04

C.tropicalis

TIMM-0324diploid

0.08

 相关产品

产品编号

产品名称

规格

价格(元)

60232ES20

Amphotericin B  Solution (250 μg/ml in water) 可溶性两性霉素B溶液(250 μg/ml in water

20ml

450.00

60234ES03

Rifampicin 利福平

1g

159.00

60234ES08

Rifampicin 利福平

5g

579.00

60212ES25

Tetracyclin HCl 四环素盐酸盐(USP

25g

168.00

60212ES60

Tetracyclin HCl 四环素盐酸盐(USP

100g

678.00

 

 

 

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