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MBP标签蛋白高度交联纯化树脂6FF

MBP标签蛋白高度交联纯化树脂6FF

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产品名称: MBP标签蛋白高度交联纯化树脂6FF

英文名称: MBPSep Dextrin Agarose Resin 6FF

产品编号: 20515ES08

产品价格: 0

产品产地: 翌圣生物

品牌商标: Yeasen

更新时间: 2023-08-17T13:40:59

使用范围: null

翌圣生物科技(上海)股份有限公司
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 MBPSep Dextrin Agarose Resin 6FF

MBP标签蛋白高度交联纯化树脂

产品信息

产品名称          

产品编号

规格

储存

价格(元)

MBPSep Dextrin Agarose Resin  6FF MBP标签蛋白高度交联纯化树脂)

20515ES08

5ml

4

858.00

MBPSep Dextrin Agarose Resin  6FF MBP标签蛋白高度交联纯化树脂)

20515ES25

25ml

4

2958.00

产品描述

MBPSep Dextrin Agarose Resin是一种纯化带有麦芽糖结合蛋白(MBP)标签蛋白的亲和层析介质,MBP可促进连接蛋白的正确折叠,增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。MBPSep Dextrin Agarose Resin 6FF可以一步纯化MBP融合蛋白,结合的融合蛋白可以用10mM麦芽糖进行温和洗脱,保护了目的蛋白的活性,MBP融合部分后续可用位点特异性蛋白酶切除。

此外,本品以高度交联的6%琼脂糖凝胶为基质,具有更高的物理化学特性,可以耐受更高的压力,在相对较高的流速下,实现对目的蛋白的纯化,更适于工业大规模蛋白的纯化。

产品性质

基质(Matrix

高度交联的6%琼脂糖微球

配体(Ligand

糊精

孔径(Bead size

45-165µm

载量(Capacity

10mg MBP蛋白(80kDa

最大压力(PressureMax

0.3 MPa, 3bar

pH稳定范围(pH range

3-12

储存缓冲液(Buffer

20%乙醇

运输和保存方法

冰袋运输。4保存,有效期2年。

需准备试剂

所用水和Buffer在使用前最好用0.22µm0.45µm滤膜过滤除菌。

结合/洗杂缓冲液20 mMTris-HCl, 200mM NaCl, 1mM EDTA,pH7.4

洗脱缓冲液20mM Tris-HCl, 1mM EDTA10mM 麦芽糖,pH7.4

【注】:结合/洗杂缓冲液或者洗脱缓冲液中可加入1mM DTT10mM β-巯基乙醇。

使用方法

【注】样品在上样前最好用0.22µm0.45µm滤膜过滤,减少杂质以防阻塞柱子。

1 MBPSep Dextrin Agarose Resin的装填(适用于各种中压色谱层析柱的填装)

1)用去离子水冲洗层析柱底筛板与接头,确保柱底筛板上无气泡,关闭柱底出口,并在柱底部留出1-2cm的去离子水。

2)将树脂悬浮起来,小心的将浆液连续地倒入层析柱中。用玻璃棒沿着柱壁倒入浆液可减少气泡的产生。

3)如果使用储液器,应立即在层析柱和储液器中加满水,将进样分配器放置于浆液表面,连接至泵上,避免在分配器或进样管中产生气泡。

4)打开层析柱底部出口,开起泵,使其在设定的流速下进行。最初应让缓冲液缓慢流过层析柱,然后缓慢增加至最终流速,这样可避免液压对所形成柱床的冲击,避免柱床形成的不均匀。如果达不到推荐的压力或流速,可以用所使用泵的最大流速,这样也可以得到一个很好的装填效果。

【注】:在随后的色谱程序中,不要超过最大装柱流速的75%,当柱床高度稳定后,在最后的装柱流速下至少再上3倍柱床体积的去离子水。标上柱床高度。

5)关闭泵,关闭层析柱出口。

6)如果使用储液器,去除储液器,将分配器至于层析柱中。

7)将分配器推向柱子至标记的柱床高度处。允许装柱液进入分配器,锁紧分配器接头。

8)将装填好的层析柱连接至泵或色谱系统中,开始平衡。如果需要可以重新调整分配器。

2 样品纯化

1平衡:5倍柱体积的结合Buffer平衡柱子,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。

2上样Resin平衡后,加入蛋白样品,使其与Resin充分接触,提高目的蛋白回收率,收集流出液。

3洗杂:用10-15倍柱体积的洗杂缓冲液进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。

4洗脱:使用5-10倍柱体积的洗脱缓冲液,收集洗脱液,即目的蛋白溶液。

5清洗与保存:依次使用3倍柱体积的结合Buffer5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%乙醇中,置于4保存,防止填料被细菌污染。

3 SDS-PAGE检测

将纯化过程中得到的样品(包括原始样品、流出组分、洗杂及洗脱组分等)利用SDS-PAGE进行检测,判定其纯化效果。

4填料清洗

随着非特异结合蛋白的增多和蛋白的聚集,会造成流速和结合载量性能下降,此时需对填料进行清洗。

13倍柱体积的去离子水;

23倍柱体积的0.1%SDS0.5M NaOH溶液;

33倍柱体积去离子水;

43倍柱体积20%乙醇,保存于4

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