Alkaline Phosphatase (30 U/μl), Calf Intestine (CIAP)
小牛肠碱性磷酸酶
产品信息

    

        

            

            
产品名称
            
            

            
产品编号
            
            

            
规格
            
            

            
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价格（元）
            
        
        

            

            
Alkaline   Phosphatase (30 U/μl), Calf Intestine (CIAP) 小牛肠碱性磷酸酶
            
            

            
20427ES80
            
            

            
1000U
            
            

            
-20℃
            
            

            
936.00 
            
        
    

产品描述
Alkaline Phosphatase，中文名碱性磷酸酶，可将DNA、RNA的5’端磷酸基团去除，常用于阻止载体的自连作用：在分子克隆实验中，DNA连接酶催化DNA连接时需要有磷酸基团的存在，载体在经酶切后会在切点端保留一个磷酸基团。而载体经碱性磷酸酶去磷酸化后因5’端无磷酸基团，因而不可以和自身3’端连接。因此连接反应中载体本身会优先发生的连接反应被阻止，提高了目的片段插入率。另外，碱性磷酸酶还可制备用于5’端标记的DNA模板，以及用于该酶蛋白的脱磷酸作用等。
本品为小牛肠来源的碱性磷酸酶，可以降解几乎所有磷酸单酯，但是该酶不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。
产品组分

    

        

            

            
组分编号
            
            

            
组分名称
            
            

            
规格
            
        
        

            

            
20427-A
            
            

            
Alkaline Phosphatase (30 U/μl)
            
            

            
1000U
            
        
        

            

            
20427-B
            
            

            
10×AP buffer
            
            

            
1ml
            
        
    

产品性质

    

        

            

            
来源（Source）
            
            

            
携带小牛肠碱性磷酸酶表达质粒的酵母
            
        
        

            

            
质量控制（Quality Control）
            
            

            
无核酸外切酶、核酸内切酶、核糖核酸酶污染
            
        
        

            

            
热灭活（Thermal Inactivation）
            
            

            
在螯合剂存在下，65℃加热30min，99%活性不可逆丧失；使用苯酚，可使酶完全失活。
            
        
        

            

            
储存液条件（Storage   conditions）
            
            

            
10 mMTris-HCl (pH8.0),   1 mM MgCl2, 50mM KCl, 0.1 mM ZnCl2, 50% glycerol.
            
        
        

            

            
活性定义（Unit definition）
            
            

            
在pH9.8, 37℃条件下，以对**苯酚磷酸盐(p-nitrophenylphosphate)为底物，1分钟生成1µmol**酚(p-nitrophenol)所用的碱性磷酸酶量定义为1个活力单位。
            
        
        

            

            
最佳pH（Optimal   pH）
            
            

            
该酶在底物浓度高的情况下其最佳反应pH为10，在底物浓度低时，最佳pH为8，此时该酶活性较高浓度底物时稍低。
            
        
        

            

            
优化体系（Optimal Buffer）
            
            

            
AP Buffer (500mMTris-HCl,   pH9.0; 10 mM MgCl2)
            
        
    

运输和保存方法
干冰运输。-20℃保存，本酶在保存条件下及其稳定。
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
 
 
 
 
 
 
使用方法
1 DNA去磷酸化
①在1.5ml离心管中加入下列试剂：

    

        

            

            
无菌ddH2O
            
            

            
Up to 50µl
            
        
        

            

            
DNA 片段*
            
            

            
1-20pmol
            
        
        

            

            
Alkaline   Phosphatase
            
            
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