说明：辣根过氧化物酶（POD）其实是一种具有氧化还原酶性质的血红素蛋白。在免疫学免疫组化相关实验中，通过辣根过氧化物酶底物显色进行组织学研究所用到的辣根过氧化物酶是酶标记法所用的一种常用手段。在其它生化实验中也用于生物液体中葡萄糖和半乳糖的测定。
别名：HRP
CAS号9003-99-0是辣根过氧化物酶在生物化学上便成为物质唯一识别码的代称，外观上观察辣根过氧化物酶是棕褐色结晶或冻干粉
辣根过氧化物酶（POD）Type VI-A溶解性：辣根过氧化物酶（POD）溶于0.1 M 磷酸盐缓冲液, pH 6.0，参考浓度10mg/ml酶活：250-330 U/mg固体，通常储存辣根过氧化物酶（POD）条件：2-8摄氏度
辣根过氧化物酶HRP 标记抗体说明书（HRP Antibody Conjugates）
规格： 0.1mL/0.5mL
保存条件： -20℃保存辣根过氧化物酶HRP，保质期为12 个月；4℃保存约3～6 个月，稀释后4℃可保存30 天左右，
稀释液为PBST（pH7.4）。

产品简介： 过氧化物酶标记抗体，是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学的各个分支学
科中的特异、敏感和安全的免疫化学制剂。本公司制备的各种HRP 标记抗体，均根据
改良的过碘酸钠氧化法标记而成。辣根过氧化物酶HRP每0.1mL 液体含有HRP 约200ug/支，IgG 约
含400ug/支。
应用范围： 抗原决定簇的抗原性分析鉴定，各种抗原、抗体的定量、定性及定位分析测定等。
稳定剂： 15mg/mL 的BSA。
工作效价： ELISA 法：1：500～5000，用TMB 作底物（OD450nm）P/N＝2.5～3.0 为阳性。
免疫印迹：1：200～5000。
免疫组化：1：20～500。
具体效价以产品标签为准，最佳使用条件需根据所检测样本的抗原及一抗效价优化而
定。
辣根过氧化物酶HRP常见问题： 1. 包被抗体或抗原不适，易产生阳性值较小，或产生变异，即跳管现象。
2. 用抗血清不纯化，或纯化程度太低的抗体包被，则阳性值较小，或没有阳性梯度。
3. 封闭不好或标记物过浓可产生对照值较高。

过氧化物酶 Peroxidase POD

过氧化物酶是由微生物或植物所产生的一类氧化还原酶,分子量范围35000~100000D，目前已知基因序列的过氧化物酶约有6000多种，过氧化物酶是以过氧化氢和其它过氧化物为电子受体催化底物氧化的酶。主要存在于细胞的过氧化物酶体中

底物+H2O2→氧化后产物+2H2O

辣根过氧化物酶 horseradish peroxidase;HRP

过氧化物酶的一种，是一种糖蛋白，由于在辣根中该酶的含量很高，故名。它以铁卟啉为辅基，在过氧化氢存在时能催化底物发生氧化反应。

辣根过氧化物酶（HRP）优点：

HRP 辣根过氧化酶是最常见的酶促发光或显色的交联酶，由于HRP比活高、特异性更强、分子量小（40kD）、稳定和作用底物范围广的优点而得到广泛使用。

      ★   分子量（40000），不会遮盖抗原的结合部位

      ★   稳定，易获得较高纯度酶

      ★   具有较高活性及特异性

      ★   可溶性佳，生成的产物不扩散

      ★   组织中内源性酶较少

      ★   可作用于多种底物，产生不同颜色

      ★  HRP穿透力强，易进入细胞内

HRP的底物

HRP的底物种类有不少，主要可以分为化学发光底物和生色底物2大类:

前者灵敏度很高——随着各大厂家努力开发研制灵敏度更高的发光底物，化学发光法的灵敏度已经达到pg级别，甚至还有 Femto级别的，灵敏度超过了同位素；而后者由于直接显色而操作简便且成本低。

对于底物的选择，主要考虑的是灵敏度、背景和使用的方便性和稳定性——比如底物可溶性高使用就比较方便；对于WB来说产物不可溶有助于信号在原位的积累和结果的稳定（产物可溶的底物更适合于Elisa）  

化学发光底物主要考虑的是：发光信号强弱——发光信号当然越强越好，强发光信号持续的时间——也是越长越好，还有就是背景低灵敏度高。

HRP生色底物类

   底物显色主要是利用底物在有HRP和过氧化氢的存在下失去电子而呈现出颜色变化积累这一过程来检测。底物被氧化后，迅速改变溶液颜色，或通过聚合等反应，生成不溶性有色颗粒，并就地原位沉淀。

底物及其特点

      酶＋底物→酶·底物→酶＋产物（有色底物）。。。显色

HRP的底物：

      HRP的底物为低浓度的H2O2，供氢体为胺类及酚类化合物。

HRP的生色底物显色有DAB，4-CN ，CN/DAB，AEC和TMB等

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