鸡骨髓中性粒细胞分离液试剂盒-常用生化试剂-试剂-生物在线
鸡骨髓中性粒细胞分离液试剂盒

鸡骨髓中性粒细胞分离液试剂盒

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产品名称: 鸡骨髓中性粒细胞分离液试剂盒

英文名称:

产品编号: P2120

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产品产地: 北京

品牌商标: Solarbio

更新时间: 2023-09-20T11:06:01

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鸡骨髓中性粒细胞分离液试剂盒

品牌:Solarbio | 货号:P2120
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P2120-200ml/KIT Solarbio 200ml/KIT 800.00元

组成:

各种动物骨髓中性粒细胞分离液200mL

细胞洗涤液200mL

全血及组织稀释液200mL

红细胞裂解液100mL

操作步骤:

1. 制备骨髓的单细胞悬液。

2. 在离心管中加入适量分离液(细胞悬液体积小于5mL时,加入5mL分离液;大于等于5mL,加入等体积分离

液。但二者的总体积不能超过离心管的三分之二,否则会影响分离效果),将细胞悬液平铺到分离液液面上

方,注意保持两液面界面清晰。(可以使用巴氏德吸管吸取细胞悬液,然

后小心的平铺于分离液上,因为两者的密度差异,将形成明显的分层界面。

如果样品较多,加样的时间较长,在离心之前出现红细胞成团下沉属正常

现象。)

3. 室温,水平转子500~1000g,离心20~30min(细胞悬液的体积越大所需的

离心力越大,离心时间越长,最佳的分离条件需摸索,离心转速最大不超

过1200g)。

4. 离心后将出现明显的分层:最上层是稀释液;稀释液与分离液之间是淋巴

细胞层;分离液中为粒细胞层(个体差异或者是分离条件不同,粒细胞层

 

可能分离不明显);最下层为红细胞层。

5. 小心的吸取分离液层到15mL洁净的离心管中,10mL PBS或细胞洗涤液洗

涤白膜层细胞。250g,离心10min(如有红细胞混杂则加入适量红细胞裂

解液)

6. 弃上清,5mL的PBS或细胞清洗液重悬细胞,250g,离心10min。

7. 重复步骤6

8. 弃上清,细胞重悬备用。

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