鱼脏器组织白细胞分离液试剂盒
产品名称: 鱼脏器组织白细胞分离液试剂盒
英文名称:
产品编号: P1860
产品价格: 0
产品产地: 北京
品牌商标: Solarbio
更新时间: 2023-09-20T11:06:01
使用范围: null
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鱼脏器组织白细胞分离液试剂盒
品牌:Solarbio | 货号:P1860
商品货号: | 商品品牌: | 规格 | 基本售价: | 选择规格 |
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P1860-200ml/KIT | Solarbio | 200ml/KIT | 800.00元 |
保存:本产品对光敏感,应该室温避光储存,保质期2 年。无菌开封后,保存于室温。
组成:
各种动物脏器组织白细胞分离液200mL
细胞洗涤液200mL
全血及组织稀释液200mL
红细胞裂解液100mL
操作步骤:
1. 制备脏器组织的单细胞悬液。
2. 在离心管中加入适量分离液(细胞悬液体积小于5mL时,加入5mL分离液;大于等于5mL,加入等体积分离
液。但二者的总体积不能超过离心管的三分之二,否则会影响分离效果),将细胞悬液平铺到分离液液面上
方,注意保持两液面界面清晰。(可以使用巴氏德吸管吸取细胞悬液,然
后将细胞悬液小心的平铺于分离液上,因为两者的密度差异,将形成明显
的分层界面。如果样品较多,加样的时间较长,在离心之前出现红细胞成
团下沉属正常现象。)
3. 室温,水平转子500~1000g,离心20~30min(细胞悬液的体积越大所需的
离心力越大,离心时间越长,最佳的分离条件需摸索,离心转速最大不超
过1200g)。
4. 离心后将出现明显的分层:最上层是稀释的稀释液层;稀释液与分离液之
间是淋巴细胞层;分离液中为粒细胞层(个体差异或者是分离条件不同,
粒细胞层可能分离不明显);最下层为红细胞层。
5. 小心的吸取淋巴细胞层及分离液层细胞到15mL洁净的离心管中,10mL
PBS或细胞洗涤液洗涤细胞。250g,离心10min(如有红细胞混杂则加入
适量红细胞裂解液)
6. 弃上清,5mL的PBS或细胞清洗液重悬细胞,250g,离心10min。
7. 重复步骤6
8. 弃上清,细胞重悬备用。
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