土壤β-葡萄糖苷酶(Solid-β-Glucosidase,S-β-GC)试剂盒
产品名称: 土壤β-葡萄糖苷酶(Solid-β-Glucosidase,S-β-GC)试剂盒
英文名称: Solid-β-Glucosidase,S-β-GC
产品编号: BC0160
产品价格: 0
产品产地: 北京/中国
品牌商标: solarbio
更新时间: null
使用范围: null
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土壤β-葡萄糖苷酶(Solid-β-Glucosidase,S-β-GC)试剂盒说明书
分光光度法50管/24样
货号:BC0160
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产品简介:
S-β-GC能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖,是纤维素分解酶系中重要组成成分之一,在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。
S-β-GC能够催化对-**苯-β-D吡喃葡萄糖苷生成对-**苯酚,产物略显黄色,在400nm有特征光吸收。
试验中所需的仪器和试剂:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
产品内容:
试剂一:甲苯5mL×1瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:粉剂×2瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入10mL蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存;
试剂三:液体40mL×1瓶,4℃保存;
试剂四:液体80mL×1瓶,4℃保存;
标准品:液体×1支, 1.5ml EP管含1ml,5mmol/L 的对**苯酚溶液。
标准样品的准备:取100μL标准液,加入到400μL试剂三中,得到1mmol/L标准液,十倍稀释到100 mmol/l,倍比稀释:50、25、12.5、6.25 mmol/L,稀释液用试剂三。100、50、25、12.5、6.25 mmol/L做标准液。
操作步骤:
试剂名称 |
测定管 |
对照管 |
标准管 |
风干土样(g) |
0.05 |
0.05 |
- |
试剂一(μL) |
25 |
25 |
- |
振荡混匀,使土样全部湿润,室温放置15min - |
|||
试剂二(μL) |
400 |
- |
- |
试剂三(μL) |
500 |
500 |
- |
混匀,37℃水浴1h后,立即沸水浴煮沸5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却 |
|||
试剂二(μL) |
- |
400 |
- |
充分混匀,10000g常温离心10min,取上清液 |
|||
上清液或标准液(μL) |
500 |
500 |
500 |
试剂四(μL) |
1000 |
1000 |
1000 |
充分混匀,室温静置2min后,400nm处蒸馏水调零,测定吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。
标准曲线建立:根据标准管的浓度(y)和吸光度(x),建立标准曲线。
S-β-GC活力的计算:
根据标准曲线,将ΔA(x)带入公式计算样品浓度(μmol/L。
单位的定义:每天每g土样中产生1μmol对-**苯酚定义为一个酶活力单位。
S-β-GC活力(U/g 土样)=y×V反总÷W÷T=0.444×y
T:反应时间,1h=1/24d;V反总:反应体系总体积:9.25×10-4L;W:样本质量,0.05g。
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