Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase(抗体法热启动Taq酶)上海翊圣生物科技有限公司

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性能参数

产品名称: Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase(抗体法热启动Taq酶)
英文名称: Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase(抗体法热启动Taq酶)
产品货号: 10113ES60
产品规格: 100U
产品产地: Yeasen
产品商标: Yeasen
价    格: 216元
保存与运输: -20℃
产品资料: 实验方法技术资料
更新时间: 2019/12/8 17:33:00
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诚信指数:900点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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产品详细描述

Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase(抗体法热启动Taq酶)

产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase(抗体法热启动Taq酶)

10113ES60

100 U

216.00

Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase(抗体法热启动Taq酶)

10113ES76

500 U

656.00

Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase(抗体法热启动Taq酶)

10113ES88

3000 U

3665.00

产品描述

Hieff UNICON® HotStart Taq DNA PolymeraseHieff UNICON® Taq抗体和Hieff® Taq DNA Polymerase货号10101ES)的混合产品。Hieff UNICON® Taq抗体与Hieff® Taq DNA Polymerase具有很高的亲和力,高温50℃处理30 min,依旧可以封闭Hieff® Taq DNA Polymerase的活性。本品在预变性温度下加热30 sec完全失活,释放出DNA聚合酶活性。使用该热启动taq酶可以有效抑制引物非特异性退火导致的扩增。 

Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase适用于热启动PCRqPCR。本品中的Hieff® Taq DNA Polymerase是热稳定重组型DNA聚合酶,具有较高的模板亲和力,非常适合低拷贝模板的扩增。扩增产物具有3′-dA,可轻松克隆用于T载体。

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

100 U

10113ES76500 U

10113ES883000 U

10113-A

Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

20 μL

100 μL

600 μL

10113-B

2×Hieff UNICON® HotStart Taq Buffer(含Mg2+dNTP 

1 mL

1 mL×5

1 mL×30

产品应用

低拷贝基因扩增、基因型鉴定

活性定义

用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,74℃30 min内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。

质量控制

DNA聚合酶活性封闭性检测:Hieff UNICON® HotStart Taq Buffer (Mg2+ Plus)中,65℃孵育30 min,活性释放低于5%

DNA聚合酶活性释放检测:Hieff UNICON® HotStart Taq Buffer (Mg2+ Plus)中,95℃加热30 sec,活性释放高于95%

核酸外切酶残留检测:20 μL反应体系,10 U本品和0.6 μg λ-HindIII74℃孵育1 hDNA的电泳谱带无变化。

核酸内切酶残留检测:20 μL反应体系,10 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA74℃孵育1hDNA电泳谱带无变化。

大肠杆菌残留DNA检测:50 μL体系中,加入2 U本品,以无菌ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。 

运输与保存方法

冰袋运输。-20℃保存,有效期2


PCR反应体系(50 μL

组分

体积

终浓度

ddH2O

to 50 μL

-

2×Hieff UNICON® HotStart Taq Buffer(含Mg2+dNTP

25 μL

模板DNA

适量

-

Primer正向 (10 μM)

2 μL

0.4 μM

Primer反向 (10 μM)

2 μL

0.4 μM

Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

0.5 μL

2.5 U/50 μL

【注】1试剂使用:各组分使用前需充分融化混匀。

2聚合酶浓度:推荐使用2.5 U/50 μL。可以在1.25-5 U/50 μL之间进行优化。

3Mg2+终浓度体系终浓度为2 mM。如有特殊需要,可用25 mM MgCl2,以0.2-0.5 mM为间隔向上摸索。

5不同模板的推荐使用量(50 μL反应体系)

模板种类

模板使用量

基因组DNA

50 ng-200 ng

质粒DNA

100 pg-20 ng

cDNA

1-5 μL (不超过反应体系的1/10)

PCR扩增程序

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

95℃

1 min

1

变性

95

10 sec

 

退火

60

20 sec

35-40

延伸

72

30 sec/kb

 

终延伸

72

10 min

1

【注】:1退火温度和时间:温度推荐使用50-60℃。退火温度过低会导致非特异性扩增。引物设计参考荧光定量引物标准。推荐退火时间设置为20 sec,可以在10-30 sec内调节。

2延伸温度和时间:温度推荐使用72℃。时间推荐使用30 sec/kb

3扩增产物:请将PCR扩增产物放置于-20℃保存,防止DNA发生降解。

4扩增程序本产品用于定量实验,可使用2步法程序扩增,去掉延伸步骤,退火和延伸合为一步,对应的时间常用30 sec或根据仪器型号设置,如Applied Biosystems 7300需用31 sec以上。

注意事项

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

相关产品

产品名称

货号

规格

价格(元)

Hieff® HotStart DNA Polymerase  配体法热启动DNA聚合酶

10110ES72/80

250/1000 U

186/636

Hieff UNICON® HotStart PCR Master Mix (With Dye)

10111ES03/08

1/5×1 mL

96/432

Hieff UNICON® HotStart PCR Master MixNo dye

10112ES03/08

1/5×1 mL

96/432

HB190225

 

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