Hieff NGSTM mRNA Isolation Master Kit上海翊圣生物科技有限公司

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性能参数

产品名称: Hieff NGSTM mRNA Isolation Master Kit
英文名称: Hieff NGSTM mRNA Isolation Master Kit
产品货号: 12603ES24
产品规格: 24 T
产品产地: Yeasen
产品商标: Yeasen
价    格: 616.00元
保存与运输: 冰袋运输。2-8℃保存
产品资料: 实验方法技术资料
更新时间: 2019/8/18 20:38:00
浏览人数:402
诚信指数:884点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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上海翊圣生物科技有限公司
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200030
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产品详细描述

产品信息

产品名称

产品编号

规格

储存

价格(元)

Hieff NGSTM mRNA Isolation Master Kit

12603ES24

24 T

2-8℃保存

616.00

Hieff NGSTM mRNA Isolation Master Kit

12603ES96

96 T

2-8℃保存

2266.00

产品描述

Hieff NGSTM mRNA Isolation Master Kit是翊圣生物自主研发的专门用于纯化mRNA的磁珠试剂盒。其中的mRNA Capture beads为偶联了OligodT)的微米级顺磁性微球,通过与带有polyA)尾巴的mRNA相结合,将mRNA0.1-4 μg完整度良好的总RNA进行分离纯化。

产品组分
组分名称
12603ES24
12603ES96
1
mRNA Capture Beads
1.2 mL
4.8 mL
2
Bead Binding Buffer
1.2 mL
4.8 mL
3
Beads Wash Buffer
15 mL
60 mL
4
Tris Buffer
1.2 mL
4.8 mL
5
Nuclease-free water
1 mL
4 mL
运输与保存方法

冰袋运输。2-8℃存,效期一年。避免冷冻!

使用方法

自备材料

磁力架,Nuclease-free离心管。

二、操作流程 

mRNA纯化试剂盒操作流程

 

一、操作步骤

3.1 实验前准备

mRNA Capture Beads4℃取出,静置使其温度平衡至室温(约30 min)。

3.2 样本准备

在一个Nuclease-free PCR管中,用Nuclease-free water0.1-4 μgRNA稀释至50 μL

将稀释的RNA置于PCR仪中,65℃5 min4℃hold,使RNA变性,冰上放置备用

3.3 mRNA与磁珠的结合

颠倒或涡旋振荡混匀磁珠,吸取50 μL磁珠悬液加入至50 μL 的变性RNA样品中,用移液器反复吹打6次,

使其充分混匀。

室温孵育5 min,使mRNA与磁珠完全结合。

将样品置于磁力架中,室温静置5 min,使mRNA与总RNA分离,吸除全部上清。

3.4 样本的洗涤

将样品从磁力架上取出,加入200 μL Beads Wash Buffer,用移液器反复吹打6次以彻底混匀。

将样品置于磁力架中,室温静置5 min,吸除全部上清。

重复上一步骤,共洗涤两次。

3.5 mRNA样本第一轮洗脱

将样品从磁力架上取出,加入50 μL Tris Buffer重悬磁珠,用移液器反复吹打6次以彻底混匀。

将样品放置于PCR仪中,80℃2 min25℃hold,将mRNA洗脱下来。

3.6 mRNA与磁珠的再次结合

加入50 μL Beads Binding Buffer,用移液器反复吹打6次以彻底混匀。

室温孵育5 min,使mRNA结合到磁珠上。

将样品置于磁力架中,室温静置5 min,吸除全部上清。

3.7 样本的洗涤

将样品从磁力架上取出,加入Beads Wash Buffer,用移液器反复吹打6次彻底混匀,将样品重新放回至磁力架中,室温静置5 min,然后吸除全部上清。

【注】:最后需要用10 μL移液器吸干净残留液体。

3.8 mRNA样本终洗脱

方案一:用于逆转录反应。

将样品从磁力架上取出,加入12 μLNuclease-free water重悬磁珠,用移液器吹打6次以彻底混匀。将样品置于PCR仪中80℃2 min后,立即置于磁力架上,室温静置5 min。待溶液澄清后,小心吸取10 μL上清至另一新的Nuclease-free PCR管中。

方案二:用于RNA文库的构建。

可根据相关试剂盒说明书加入相应体积的Frag/Primer Buffer,进行文库构建。

【注】:样品可置于冰上继续进行NGS文库构建或其他分析应用(建议立即进行后续反应),也可以置于-80℃保存。

注意事项

1)磁珠使用前务必要回温至室温,并充分混匀,否则可能影响样品的回收效率。

2)操作过程要严格保证无RNase酶和核酸污染。

3本产品和其他试剂配套使用时,请按照具体实验说明来进行操作。

4)想要获得好的纯化效果,需要有完整度良好的总RNA,确保RIN值在7.0及以上。

5)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


 

 

 

 

 

Yeasen Biotech Co., Ltd.

 

Service call400-6111-883

Emailorder@yeasen.com

Webwww.yeasen.com

AddFloor 3,Building 1,No.166 Tianxiong Road,

International Medical Zone(SIMZ) ,Shanghai,China

 

 

 

 

 



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