pcDNA4/HisMax C基因工程的基本操作程序：

1、目的基因的获取

（1）目的基因是指： 编码蛋白质的结构基因。

（2）获取方法：①从基因文库中获取；②人工合成（反转录法和化学合成法）；③PCR技术扩增目的基因。

2、基因表达载体的构建

（1）pcDNA4/HisMax C目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。

（2）组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。

(1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DN**段之间连接形成的产物有目的基因和载体连接物、载体和载体连接物、目的基因和目的基因连接物三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行分离、纯化(或筛选)。

(2)pcDNA4/HisMax C用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是载体和载体连接物；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物有目的基因和载体连接物、载体和载体连接物。

(3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是，其合成的产物是启动子mRNA。

(4)pcDNA4/HisMax C在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是_EcoRⅠ和BamHⅠ。XY871101 一步法大提质粒DNAOUT 5次

XY880917 一步法96孔板质粒DNAOUT(离心法) 1次

XY870804 一步法单菌落质粒 DNAOUT 50次

XY880932 一步法96孔板单菌落质粒DNAOUT(离心法) 1次|5次

XY861202 一步式广谱DNAOUT 10mL

XY880930 微量样品核酸提取试剂盒 50次|200次

XY8121001 液体样品DNAOUT 50次

XY860607 液相内毒素清除剂 100次|500次

XY860608 固相内毒素清除剂 100g|500g

XY8130501 柱式内毒素清除剂 1.5mL

XY8130419 内毒素清除专用亲和介质 5mL|50mL

XY8120415 终点显色法内毒素定量试剂盒 32次

XY8130504 凝胶法内毒素半定量试剂盒 10×0.1mL

XY851203 非酶RNA清除剂1.0 1.5mL

XY860912 非酶RNA清除剂2.0 1.5mL

XY860801 柱式腐殖酸清除剂 30次|100次

XY8111008 非酶多糖清除剂(DNA专用) 50次

XY860804 PCR抑制物清除剂 1mL

XY860911 硅胶膜离心吸附柱系列(小提) 50套

XY890303 硅胶膜DNA离心吸附柱(大提) 1套

XY860606 硅胶膜离心吸附柱再生液 500次

XY8100307 酸洗玻璃珠系列 10g

XY8130514 硅基磁珠 2mL