果胶酶活性检测试剂盒北京索莱宝科技有限公司

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性能参数

产品名称: 果胶酶活性检测试剂盒
英文名称: Pectinase Assay Kit
产品货号: BC2630
产品规格:  50管/24样
产品产地: 北京索莱宝
产品商标: Solarbio
价    格: 970元
保存与运输: 2-8度
现货状态: 现货
产品资料: 实验方法技术资料
更新时间: 2018/12/5 10:15:00
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诚信指数:1037点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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产品详细描述

果胶酶活性检测试剂盒 可见分光光度法

品牌:Solarbio | 货号:BC2630

产品内容:
提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 20mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 25mL×1 瓶,4℃避光保存。


产品说明:
       果胶酶(pectinase)是一类分解果胶质酶类的总称,包括原果胶酶,果胶酯酶,多聚半乳糖醛酸酶和果胶裂解酶四大类,广泛存在于植物果实和微生物中,主要用于食品、酿酒、环保、医药、纺织及日化用品行业。
      果胶酶水解果胶生成半乳糖醛酸,具有还原性醛基,与 DNS 试剂反应生成红棕色物质,在540nm 有特征吸收峰,测定 540nm 处吸光值变化可计算得果胶酶活性。

所需仪器和试剂:
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅。


操作步骤:
酶提取:
1. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL提取液),进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2. 细菌、真菌:按照细胞数量(10 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间3min);然后 10000g,4℃离心 10min,取上清置于冰上待测。
3. 细胞培养液等:直接检测。 

测定操作表:




酶活计算公式:
标准曲线:y = 0.1544x - 0.1537,R2 = 0.9996

1.按照蛋白浓度计算
酶活性定义:在 50℃,pH3.5 条件下,每毫克蛋白每小时分解果胶产生 1mg 半乳糖醛酸为一个酶活力单位。
果胶酶活性(mg/h/mg prot)=(△A+0.1537) ÷0.1544×V 反总÷(V 样×Cpr)÷T =129.53×(△ A+0.1537)÷Cpr

2.按照样本质量计算
酶活性定义:在 50℃,pH3.5 条件下,每克样本每小时分解果胶产生 1mg 半乳糖醛酸为一个酶活力单位。
果胶酶活性(mg/h /g)=(△A+0.1537) ÷0.1544×V 反总÷(V 样×W÷V 样总)÷T = 129.53×(△ A+0.1537)÷W

3. 按细胞数量计算
酶活性定义:在 50℃,pH3.5 条件下,每 10 细胞每小时分解果胶产生 1mg 半乳糖醛酸为一个酶活力单位。
果胶酶活性(mg/h /104cell)= (△A+0.1537) ÷0.1544×V 反总÷(V 样×细胞数量÷V 样总)÷T = 129.53×(△ A+0.1537)÷细胞数量

4.细胞培养液
酶活性定义:在 50℃,pH3.5 条件下,每毫升培养液每小时分解果胶产生 1mg 半乳糖醛酸为一个酶活力单位。
果胶酶活性(mg/h /mL)=(△A+0.1537) ÷0.1544×V 反总÷V 样÷T =129.53×(△A+0.1537)
V 反总:反应总体积,1mL;V 样:反应中样本体积,0.1mL;V 样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白浓度,m


注意事项:
1. 试剂一若有沉淀析出,请置于 50℃加热溶解。
2. 测定之前请先做预实验,如果吸光值较高或较低,请用提取液做适当的稀释或者加大样本量,并在计算公式中乘以稀释倍数或者以实际加入的样本体积参与计算。
3. 煮沸样本建议在沸水中煮沸 10 分钟,以将酶彻底灭活。


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