Sagiyama病毒RT-PCR试剂盒上海信裕生物科技有限公司

金牌供应商

性能参数

产品名称: Sagiyama病毒RT-PCR试剂盒
英文名称: Sagiyama
产品货号: XY-1266P
产品规格: 50T
试剂级别: 分析纯
产品产地: 中国/美国/德国/日本
产品商标: 信裕生物
价    格: 1490元
保存与运输: -20℃
现货状态: 18
产品资料: 实验方法技术资料
更新时间: 2020/1/14 10:09:00
浏览人数:0
诚信指数:3891点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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产品详细描述

Sagiyama病毒RT-PCR试剂盒

Sagiyama

产品及特点

本产品包含Taq DNA聚合酶、dNTPsMgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可最大限度的减少人为误差。使用时只需加入DNA模板和引物既可。使用方便快捷,能避免PCR操作过程中的污染,使用时只需取适量2×TaqPCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀,操作需在冰上进行。

Taq扩增效率最高的耐热 DNA 聚合酶,其扩增速度约为 1-2kb/min。扩增碱基出错率为 10-5 左右。其产物未端带有 A,可直接用于 TA 克隆。

Pfu目前保真度最高的耐热 DNA 聚合酶,碱基出错率为 10-6,但扩增效率低于 Taq 酶, 一般能很好的扩增 2kb 以下的片段。其扩增速度约为 500bp/min 左右。其产物为平未端,须加 A后才可用于 TA 克隆。

Taq PlusTaq Pfu 的等比混合物。集扩增效率高和保真度好于一身。扩增效率比 Pfu 高, 保真度比 Taq 好。其扩增速度约为 1000bp/min 左右。其产物未端带有 A,可直接用于 TA 隆。 含染料 PCR MasterMix 反应完后可以直接电泳检测。不含染料的 PCR MasterMix 反应完后 加入上样缓冲液后电泳检测。

产品名称

方法

规格

价格

Sagiyama病毒RT-LAMP试剂盒

LAMP

50

2490

Sagiyama病毒RT-PCR试剂盒

PCR

50

1490

Sagiyama病毒RT-染料法荧光定量PCR试剂盒

染料法

50

2490

Sagiyama病毒RT-探针法荧光定量PCR试剂盒

探针法

50

3490

它具有下列特点:

1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。

2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增Sagiyama病毒RT-,与其他微生物没有交叉反应。

3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。

规格及成分

成分

编号

十孔盒包装

PCR MagicMix 3.0

试剂一

1 mL(红盖)

超纯水

试剂二

1 mL(亮黄色)

Sagiyama病毒RT-PCR引物混合液

试剂三

100 μL(白盖)

Sagiyama病毒RT-PCR 阳性对照

1×10E8 拷贝/μL

试剂四

50 μL(黄盖)

核酸释放剂(试用装)

试剂五

20 次(1 mL,绿盖)

使用手册

试剂六

1

运输及保存:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。

自备试剂:样品 DNA

使用方法:

 一、样品 DNA 的制备

1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。本试剂盒免费赠送20 次核酸释放剂试用装,其使用手册可以从本公司网站订购核酸释放剂。

2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL 补骨脂 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。

二、设置 PCR 反应(40μL 体系)

3. N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 PCR 管中分别加入下列成分:

成分

N+2 个样品管

PCR 阴性对照

PCR 阳性对照

PCR MagicMix 3.0

20 μL

20 μL

20 μL

Sagiyama病毒RT-PCR引物混合液

2 μL

2 μL

2 μL

N+2 个样品 DNA 模板

18 μL

--

--

PCR 阴性对照(水)

--

18 μL

--

PCR 阳性对照(Sagiyama病毒RT-PCR阳性对照的 1000

倍稀释液)

--

--

18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应:

过程

温度

时间

预变性

95

5 min

PCR 反应(35 个循环)

95

15 sec

57

15 sec

72

40 sec

最后延伸

72

10 min

三、电泳检测

5. 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading bufferPCR 产物阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

 

 

 

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