土壤酸性转化酶试剂盒微量法上海雅吉生物科技有限公司

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性能参数

产品名称: 土壤酸性转化酶试剂盒微量法
英文名称: Amylase Assay kit
产品货号: YS29237
产品规格: T25
试剂级别: 细胞培养级
产品产地: 中国
产品商标: 雅吉生物
价    格: 询价元
保存与运输: 室温
现货状态: 1000瓶
产品资料: 实验方法技术资料
更新时间: 2021/1/21 9:29:00
浏览人数:14
诚信指数:661点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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上海雅吉生物科技有限公司
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产品详细描述

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
土壤酸性转化酶试剂盒微量法测定意义:
S-AI 在 pH 为 4.5~5.0(酸性)条件下催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是土壤
微生物蔗糖代谢关键酶之一。
测定原理:
S-AI 催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与 3,5-二**水杨酸反应,生成棕红色氨基化
合物,在 510nm 有特征光吸收,在一定范围内 510nm 光吸收增加速率与 AI 活性成正比。
自备用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、
冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 25mL 试剂一充分溶解备用;用不完的试剂 4℃
保存;
试剂三:液体 10mL×1 瓶,4℃保存;
测定步骤和加样表:
试剂名称(μL) 测定管 对照管
风干土样(g) 0.05 0.05
试剂一 400
试剂二 400
混匀, 37℃准确水浴 30min 后,95℃水浴 10min(盖紧,以防水分散失),流水冷却后
充分混匀(以保证浓度不变),10000g 25℃离心 10min,取上清液
上清液 200 200
试剂三 100 100
混匀,95℃水浴 10min(盖紧,以防止水分散失),流水冷却后充分混匀, 510nm 处,记录
各管吸光值 A,如果吸光值大于 2,可以用蒸馏水稀释后测定(计算公式中乘以相应稀释倍
数),ΔA=A 测定-A 对照。
S-AI 活性计算:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0016x -0.001;x 为标准品浓度(μg/mL),y 为吸光值。
单位的定义:每天每 g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个 S-AI 活力单位。
S-AI 活力(mg/d /g 土样)=[(ΔA +0.001) ÷0.0016×V 反总÷W÷T ÷1000=240×(ΔA+0.001)
V 反总:反应体系总体积:0.4mL;T:反应时间,1/48d; W:样本质量,0.05g;1mg=1000μg。
b.用 96 孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为 y = 0.0008x -0.001;x 为标准品浓度(μg/mL),y 为吸光值。
单位的定义:每天每 g 土样中产生 1mg 还原糖定义为一个 S-AI 活力单位。
S-AI 活力(mg/d/g 土样)=[(ΔA +0.001) ÷0.0008×V 反总÷W÷T ÷1000=480×(ΔA+0.001)
V 反总:反应体系总体积:0.4mL;T:反应时间,1/48d; W:样本质量,0.05g;1mg=1000μg。

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