HB170328
 Hieff MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit 
定点突变试剂盒

产品信息
 
     
         
             
产品名称
             
货号
             
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Hieff   MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit 定点突变试剂盒
             
11003ES10
             
10 T
             
-20℃
             
720.00
             
720.00
         
     
 
 
产品描述
 
Hieff MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit是基于HieffCloneTM快速克隆技术的定点突变系统。使用本试剂盒，目标质粒扩增产物经DpnI消化、HieffCloneTM重组环化后直接进行转化即可完成定点突变。该试剂盒由两个模块组成：HieffTM Pfu DNA Polymerase扩增模块和HieffCloneTM快速克隆模块。HieffTM Pfu DNA Polymerase超高的保真度显著降低了扩增过程中引入新突变的可能性，其卓越的长片段扩增能力，广泛适用于长度小于20 kb的任何质粒扩增。HieffCloneTM快速克隆系统利用高效的同源重组反应替代传统的退火成环反应。因此使用Hieff MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit进行DNA定点突变时，引物设计更加灵活，且扩增反应不再需要以线性方式进行，极大减少了模板使用量，有利于原始甲基化模板的彻底降解。HieffCloneTM技术可以高效完成两个PCR产物的无缝拼接，因此该试剂盒还能以单次扩增的方式对目标质粒上不连续的两个位点同时进行突变。
 
Hieff MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit中的重组酶Exnase经过优化，专门针对单碱基、不连续双碱基定点突变。此外，如扩增产物特异，其DpnI消化产物可不进行DNA纯化而直接用于重组反应。高度优化的反应缓冲液、快捷的操作流程以及极高的成功率，使得Hieff MutTM Site-Directed Mutagenesis Kit成为DNA定点突变首选试剂盒。
 
应用范围
 
DNA定点突变（单碱基、连续多碱基、不连续双碱基）
 
注：如使用本品对质粒进行定点突变，请使用甲基化酶无缺陷的宿主菌 (例如Top10、DH5α、JM109)扩增原始质粒！
 
产品组成
 
     
         
             
编号
             
组分
             
产品编号/规格
         
         
             
11003ES10 （10 T）
         
         
             
-A
             
2×HieffTM II PCR buffer 
             
500 μl
         
         
             
11003-B
             
dNTP Mix (10 mM each)
             
20 μl
         
         
             
11003-C
             
HieffTM II Pfu DNA Polymerase (1 U/μl)
             
0 μl
         
         
             
11003-D
             
Dpn I (10 U/μl)
             
20 μl
         
         
             
11003-E
             
2×Hieff Clone Enzyme Premix
             
100 μl
         
     
 
  
运输与保存方法
 
冰袋（wet ice）运输。产品-20 ºC保存。

 
单碱基（或连续多碱基）定点突变实验方案
 
实验流程概览（图一）