rTEV蛋白酶使用说明书
货号：P2060
规格：1000U（200uL）

产品简介：
rTEV蛋白酶(重组型)是经过基因工程改造后的重组蛋白酶，该酶特异性识Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe- Gln-Gly七氨基酸序列。
rTEV蛋白酶与肠激酶U(EK)、Thrombin、FactorXa、SUMO等蛋白酶相比，具有高活性、高特异性的双重特点，rTEV蛋白酶因具高剪切活性和特异性，已成为融合蛋白表达后去除融合tag的首选蛋白酶。
该酶经6×His标签纯化而得(含组胺酸标签)，纯度达99％，剪切反应完毕后可通过His标签纯化树脂Ni-NTA Resin(Cat.No. P2010)去除。
产品内容：
试剂名称	rTEV蛋白酶规格	 rTEV蛋白酶保存温度 rTEV蛋白酶（5U/uL）	200uL	 -80℃
250×rTEV Protease Buffer	1mL	 -20℃
说明书	1份
保存rTEV蛋白酶条件：rTEV蛋白酶-80℃长期保存，可存储2年；首次使用后可置于-20℃保存，可储存6个月，避免反复冻融。250×rTEV Protease Buffer可置于-20℃保存。
酶活定义：
在1×rTEV Protease Buffer中，30℃反应1h，剪切>85%的3ug底物所需要的酶量定义为一个活性单位。
使用方法说明：
1.推荐使用溶液：50 mM NaH2PO4, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM DTT, 10%甘油，pH 8.0 buffer中进行剪切。
2.250×rTEV Protease Buffer：250mM EDTA, 250 mM DTT, PH 8.0
3.rTEV蛋白酶与需要酶切的目的蛋白比例：1：100
4.酶切体系：
	融合蛋白1000 ug
	250×rTEV Protease Buffer 4uL						
	rTEV蛋白酶2uL
	定容至1000uL
	定容缓冲液：50 mM NaH2PO4, 150mM NaCl
5.酶切条件：在16℃酶切6hr。用户可以根据自己研究的目的蛋白进行摸索酶切条件，可适当加大酶量或延长酶切时间。
6.可取少量样本进行SDS-PAGE分析，若要去除酶切后体系中的rTEV蛋白酶，可用His标签纯化树脂亲和层析。