2× SYBR Mixture-PCR/RT-PCR/qPCR-试剂-生物在线
2× SYBR Mixture

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产品名称: 2× SYBR Mixture

英文名称: Wehelp 2× SYBR Mixture

产品编号: Molebio-004

产品价格: 0

产品产地: 中国

品牌商标: wehelp

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江苏伟禾生物科技有限公司
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Wehelp GoldenSYBR Mixture是专用于染料法(SYBR Green Ӏ)实时荧光定量PCR的预混体系,浓度为,包含GoldenTaq DNA PolymerasePCR BufferdNTPsSYBR Green Ӏ荧光染料和Mg2+。配制好的预混合液操作简单便捷、能有效缩短操作时间,减少移液过程中混入的污染。

SYBR Green Ӏ是一种结合于dsDNA双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的荧光染料SYBR Green ӀdsDNA 结合荧光信号会增800-1000倍,是一种常用的qPCR荧光染料。该染料性价比高、操作简便,具有高灵敏度信噪比高等优势,可应用于基因表达差异分析,基因芯片等。

    Molebio-004使用了全新高效的Taq DNA PolymeraseWehelp独特配制的PCR缓冲体系,Taq DNA Polymerase具有5-3聚合酶活性和3-5外切酶活性,PCR反应灵敏度高、特异性强。

 优点

Ø 配制好的预混合液中只需加入模板、 引物、灭菌水便可进行 Real Time PCR 反应,操作简单方便

Ø 适用于荧光定量PCR检测,能够准确地对目的基因进行定量和检测。

Ø SYBR Green Ӏ 染料经济实惠,使用方便,灵敏度高、信噪比强

 

注意事项

Ø -20℃避光保存,防止污染。

Ø 使用前,将产品室温下解冻,并轻轻涡旋混匀,解冻后所有实验应在冰上操作。 

Ø 避免反复冻融,反复冻融可能使产品性能下降。

Ø 荧光定量PCR上进行实时PCR,并在退火或延伸步骤记录荧光信号。

 Ø 本产品未添加ROX校正染料

Ø 本产品不能用于探针法荧光定量PCR

 

使用指导

1PCR反应体系

试剂

50 μl 反应体系

终浓度

 SYBR  Mixture

25 μl

1×

10 μM Forward Primer

1 μl

0.2 μM

(0.05-1 μM)

10 μM Reverse Primer

1 μl

0.2 μM

(0.05-1 μM)

Template DNA

2 μl

 

ddH2O

to 50 μl

 

 

2PCR循环反应条件

步骤

循环次数

温度

时间

1

1

96

2

2

35~40

95

15

60~64

(信号采集点)

1

3

1

(解曲线)

95

15

60

1

95

15

60

15

 

反应条件优化

引物浓度:一般以引物浓度0.2 μM为最佳浓度,终浓度0.05-1.0 μM参考范围。降低引物浓度提高反应特异性;增加引物的浓度提高扩增效率,优化反应体系。

退火温度:升高退火温度是常用的提高反应特异性的方法,