大肠杆菌C43(DE3)菌种的来源、传代、分离复壮、使用和鉴定等均应该做好详细记录。包括菌种时间、名称、菌号、代数、保存方式、分离复壮方式、使用内容、鉴定情况等。

菌种保藏由于影响因素过多，细胞/组织培养中出现的一些问题往往很难分析并得到解决，因此被人戏称为“黑色艺术”或“巫术”。本文列举了一些动物细胞/组织培养中常见的问题及解决方法。      

1. 大肠杆菌C43(DE3)菌种培养试剂的保存：

   血清：-5oC - -20oC 保存，避免反复冻融。

   培养基:  2oC – 8oC避光保存。

   完全培养基: 2oC – 8oC避光保存，并在2周内用完。

   尽量缩短血清和培养基见光的时间

 2.液体培养基中谷氨酰胺使用方法：

很多细胞生长要求在培养液中添加谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20◦C冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4◦C 冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。大肠杆菌C43(DE3)菌种另一种选择是使用L-谷氨酰胺的衍生物 - L-alanyl-L-glutamine dipeptide（如GenDepot的产品Glutaplex配方中含有的成分之一） 替代L-谷氨酰胺。Glutaplex与L-谷氨酰胺相比更加稳定，降解比较慢，提高细胞的存活和生长，极大降低对细胞有毒性的氨的积累。

3.培养基中是否应加酚红：

 大肠杆菌C43(DE3)菌种酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂，中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时紫色。研究表明，酚红可以模拟固醇类激素的作用，特别是雌激素。为避免固醇类反应，培养细胞尤其是哺乳类细胞时，应使用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时不使用加酚红的培养基。EC482 BJ? 人皮肤成纤维细胞 人 EMEM 贴壁

EC487 ECNE1 人鼻咽癌细胞(高分化) 人 1640 贴壁

EC488 ECNE2 人鼻咽癌细胞(低分化) 人 1640 贴壁

EC489 EC2EC12 小鼠成肌细胞 小鼠 DMEM 贴壁

EC490 HASMEC 人主动脉平滑肌细胞 人 DMEM 贴壁

EC492 H8 人宫颈上皮永生化细胞 人 1640 贴壁

EC493 BEAS-2B 人正常肺上皮细胞 人 DMEM 贴壁

EC854 MDA-MB-361 人乳腺癌细胞 人 EMEM 贴壁

EC1324 AU-565 人乳腺癌细胞 人 1640 贴壁

EC1324 UAECEC-812 人乳腺导管瘤细胞 人 DMEM 贴壁

EC494 FHs 74 Int 人小肠正常细胞 人 1640 贴壁

EC498 HEL 92.1.7   人白血病细胞系 人 1640 悬浮

EC694 Karpas-299 人间变性大细胞 人 IMDM 悬浮

EC586 OVISE 人卵巢癌细胞 人 1640 贴壁

EC499 NECI-H1792 人肺癌腺癌细胞 人 1640 贴壁

EC960 NECI-H358 人非小细胞肺癌细胞 人 1640 贴壁

EC500 TECam-2 睾丸精原细胞瘤细胞 人 DMEM 贴壁

N1E-115 小鼠神经母细胞 小鼠 无

EC779 LL-PK1 猪肾细胞 人 DMEM 贴壁

EC502 GM12878 人B淋巴细胞 人 IMDM 悬浮

EC504 HaECat 人永生化角质形成细胞 人 DMEM 贴壁

Wnt5a 人 无

EC505 AML12 小鼠正常肝细胞 小鼠 DMEM 贴壁

EC506 HFLS-OA 人滑膜关节炎成纤维细胞 人 DMEM 贴壁

EC507 FRH-0201 人胆管癌细胞 人 DMEM 贴壁