磷酸化蛋白提取试剂盒北京索莱宝科技有限公司--实验室产品

性能参数

产品名称: 磷酸化蛋白提取试剂盒
英文名称:  磷酸化蛋白提取试剂盒
产品货号: BC3730
产品规格: 50T/100T
产品产地: 北京
产品商标: solarbio
价    格: 580.00/880元
保存与运输: -20℃
现货状态: 大量现货
产品资料: 资料下载
更新时间: 2019/6/24 16:41:00
浏览人数:234
诚信指数:579点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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北京索莱宝科技有限公司--实验室产品
地址:
北京市通州区马驹桥联东U谷景盛南四街85A三层
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传真:
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联系人:
马金成
所在区域:
北京·北京
邮件:
公司展台:

产品详细描述

 ***酸化蛋白提取试剂盒用于哺乳动物组织和细胞中提取总蛋白,试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和***酸酶抑制剂,作用较为强烈,可快速获得总蛋白,可用于免疫印迹实验等基础研究实验,由于含有上述的酶抑制剂,不能用于研究蛋白激酶和***酸激酶的研究。本品仅用于科研。


产品组成:

 

规格

储存条件

裂解液

100 ml

2-8 oC

***酸酶抑制剂(100x

1ml

-20 oC

蛋白酶抑制剂(100x

1 ml

PMSF100x

1ml

 

操作方法:
1、组织总蛋白的提取
在1ml的冷裂解液中各加入10ul的***酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF;混匀,放置在冰上备用;
称取0.1g的新鲜组织,放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处,用眼科剪将组织块尽可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直至没有明显的组织块,这个过程注意冰上操作;
将组织匀浆液移入1.5ml的EP管中,4 oC 12000g离心30min;
吸取上清至新的管中;
进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
(提取好的蛋白建议保存于-80 oC,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。)
2、细胞总蛋白的提取
裂解液的用量:107个细胞需要裂解液1ml;
贴壁细胞:弃去培养基,用冷的PBS洗两次,弃去PBS,然后加入计算好的细胞裂解液;在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞,
将刮离的细胞裂解液移入EP管中,颠倒裂解20-30min
悬浮细胞:4 oC 400g离心收集细胞,用冷的PBS洗两次细胞,同样按细胞数加入裂解液,
涡旋10s,放置冰上裂解10min,重复3-4次;
裂解完毕之后,将细胞裂解液4 oC 12000g离心30min;
将上清移入新的EP管中;
进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
(提取好的蛋白建议保存于-80 oC,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。)

注意事项:
实验过程,所有试剂都要需要预冷或者即融,保证操作过程中的低温环境;
PSMF(有毒)现用现加,因为PMSF在水溶液中会快速降解;

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