Golden 1st cDNA Synthesis Kit上海沪震实业有限公司

产品详细描述

 Golden 1st cDNA Synthesis Kit

描述：本试剂盒采用稳定高效的反转录预混体系 5×Golden RT MasterMix 进行 RNA 的反转录反应，使用时只需加入模 板、引物和 RNase Free H2O 即可，大大简化了操作过程、 提高了效率、减少了操作过程中的人为误差。MasterMix 中 添加了 HL dsDNase（热敏双链特异性核酸酶），该双链特 异性核酸酶（又名 gDNA Remover）可在反转录的过程中， 直接降解去除 RNA 中残留的基因组 DNA 污染(可去除 100ng 基因组 DNA)，从而在定量 PCR 的检测中无需考虑基 因组污染的干扰，设计的定量 PCR 引物也无需进行横跨外 显子。该试剂盒尤其适用于定量 PCR 检测。 该预混体系包含点突变致 RNase H 活性缺失的 Golden MLV Reverse Transcriptase 反转录酶、dNTP、反 应 Buffer、HL dsDNase 和 RNase Inhibitor。该试剂盒采用 的反转录酶去除了 RNase H 活性，从而避免反转录过程中 降解 RNA。同时经过突变文库筛选，使得其热稳定性更强， 可耐受 55℃高温反应。相比于低温条件下反转录反应，采用 高温反转录可显著打开 RNA 二级结构，从而提高复杂 RNA 模板的扩增性能、提高反转录 cDNA 的长度和产量，从而提 高后续检测的灵敏度。合成的第一链 cDNA 可广泛用于 2nd Strand 的合成、杂交、PCR 扩增、Real-Time PCR 反应等。 应用： （1）该制品可有效反转录 mRNA、tRNA、LncRNA、ncRNA （2）该制品不可反转录 microRNA、病毒 DNA/RNA 样品 组分 名称 100T 5×Golden RT MasterMix (with dsDNase) 400 μl 20×Oligo dT(25)&Random Primer 100 μl RNase Free H2O 1 ml × 2 储存：请置于-20°C，可保存 3 年；避免反复冻融。 注：如 5×Golden RT MasterMix (with dsDNase)出现沉淀属 正常现象，可用手捂化，混合均匀后使用不影响实验结果。 1. 按以下组分配制反转录反应液 Total RNA or Poly(A) RNA 0.1-2 μg 5×Golden RT MasterMix(with dsDNase) 4 μl *20×Oligo dT(25)&Random Primer 1 μl Rnase Free H2O Up to 20 μl *注：反转录引物可根据需要改用特异性引物。 2.根据实际情况反转录可选择快速程序或标准程序 快速程序 37°C 15~30min（cDNA 合成） 85°C 5min（失活 MLV） 标准程序 25°C 10min（引物配对） 55°C 30~60min（cDNA 合成） 85°C 5min（失活 MLV） 注：通常在定量 PCR 实验中使用快速程序进行反转录（反 转录效率>80%），在进行高 GC 含量、含复杂二级结构、长 片段的模板转录时采用标准程序（反转录效率>100%）。

cDNA第一链反转录试剂盒采用稳定高效的反转录预混体系5×Golden RT MasterMix进行RNA的反转录反应，使用时只需加入模板、引物和RNase Free H2O 即可，大大简化了操作过程、提高了效率、减少了操作过程中的人为误差。MasterMix中添加了HL dsDNase（热敏双链特异性核酸酶），该双链特异性核酸酶（又名gDNA Remover）可在反转录的过程中，直接降解去除RNA中残留的基因组DNA污染(可去除100ng基因组DNA)，从而在定量PCR的检测中无需考虑基因组污染的干扰，设计的定量PCR引物也无需进行横跨外显子。该试剂盒尤其适用于定量PCR检测。 该预混体系包含点突变致RNase H活性缺失的Golden MLV Reverse Transcriptase反转录酶、dNTP、反应Buffer、gDNA去除试剂和RNase Inhibitor。该试剂盒采用的反转录酶去除了RNase H活性，从而避免反转录过程中降解RNA。同时经过突变文库筛选，使得其热稳定性更强，可耐受55℃高温反应。相比于低温条件下反转录反应，采用高温反转录可显著打开RNA二级结构，从而提高复杂RNA模板的扩增性能、提高反转录cDNA的长度和产量，从而提高后续检测的灵敏度。合成的第一链cDNA可广泛用于2nd Strand的合成、杂交、PCR扩增、Real-Time PCR反应等。

组分

组分名称 数量 5XGolden RT MasterMix ( (with dsDNase) 400 μl 20XOligo dT(25)&Random Primer 100 μl Rnase Free H2O 1 ml×2 注：1.该制品可有效反转录mRNA、tRNA、LncRNA、ncRNA。     2. 该制品不可反转录microRNA、病毒DNA/RNA样品。

主要特征

dsDNase有效去除基因组的污染，抑制了因基因组污染引起的非特异性扩增 55℃进行反转录的MLV反转录酶，能更好的转录含有复杂高级结构的RNA模板 高效便捷的反转录预混体系 反转录引物为Random Primer和Oligo dT Primer预混的RT Primer Mix，可更好的合成样品中的各种cDNA

储存

请置于-20°C，可保存2年；避免反复冻融。注：如5×Golden RT MasterMix(with dsDNase)出现沉淀属正常现象，可用手捂化，混合均匀后使用不影响实验结果。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！