无血清细胞冻存液（Serum-free Cell Freezing Medium）

产品货号：HC01

▶ 产品描述

本品为无色透明澄清溶液，有粘性，含 10 %DMSO。无细菌、真菌、支原体，pH=7.2~7.8，内毒 素< 1 EU/mL。用于-80℃、-196℃冷冻保存常用细胞系，不含蛋白质和任何动物源成分。

▶ 产品信息

▶ 使用说明

1. 准备细胞： 

1.1 检查并确认细胞没有真菌、细菌、支原体污染； 

1.2 冻存前的细胞处于增殖旺盛的对数生长期最佳；

1.3 计数待冻存的细胞数量。悬浮细胞应180g离心5~10min后除去培养基，贴壁细胞应消化后 计数，再180g离心去培养基以获得细胞沉淀。 

2. 细胞冻存： 

2.1 首先确定细胞适宜的冻存密度和体积，计算应使用的细胞冻存液体积； 

注：可使用的冻存密度为 1~10×10 6 /mL，推荐冻存密度为 2~5×10 6 /mL。冻存体积为 0.5~1mL/ 管。

2.2 吸取适量细胞冻存液重悬细胞，使用前产品应当2~8℃预冷。细胞重悬后应当立即分装至细 胞冻存管； 

2.3 经冻存液重悬后的细胞不能在室温或2~8℃静置超过10min 以上，应当尽快将冻存管移入 -80℃低温冰箱，不采取任何程序降温措施或使用程序降温装置。如果无法立即移入-80℃低温冰 箱，至少应当先移入低于0℃环境中（如-20℃冰箱）短暂存放10 min 左右，同样不采取程序降 温；

2.4 -80℃冰箱过夜后的冻存管，若长期储存，可移入液氮罐中保存。若短期取用，可于-80℃短 期保存数月，保存时间效果因细胞类型而不同。

注：1.初次使用本产品冻存的细胞类型，应测试保存时间和效果后再使用； 2.参考数据：C3A 细胞以 1×10 6 /mL/管于-80℃保存 12 个月后复苏，即时活率>90%。

3. 细胞复苏： 

3.1 先准备室温或37℃预温好的完全培养基，其体积为冻存液体积的9倍；

3.2 取出液氮或-80℃中的冻存管，置于37 ℃水浴并不断轻摇。待剩余1粒米大小的冰块时，迅 速移出水浴；

3.3 立即吸取冻存液至完全培养基中，轻柔吹打3~5次混匀。然后，180g 离心5~10分钟，获得细 胞沉淀备用。

4. 注意事项： 

4.1 本产品仅限于专业人员科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得 存放于普通住宅内； 

4.2 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作； 

4.3 分装后在-20℃冷冻保存，使用前解冻并充分混匀。

  注意：For research and manufacturing use.