基因合成/QPCR检测/ChIP服务威斯腾生物

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技术服务信息

服务名称:基因合成/QPCR检测/ChIP服务
服务类别:分子生物学服务 - 基因合成服务
价格:询价
允许参观:允许参与实验
所在区域:重庆.重庆
更新时间:2019/11/15 14:09:00
浏览人数:1494
服务商:威斯腾生物
诚信指数:1716点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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威斯腾生物
地址:
重庆高新区生物医药研发产业园D栋
邮编:
400039
电话:
4006756758
传真:
023-65316016
联系人:
张老师
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重庆·重庆
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技术服务详细描述

基因合成/DNA提取纯化/QPCR/ChIP服务


基因合成

实验室通常用PCR和RT-PCR的方法来获取某个基因片段,但是往往因为标本和模板等原因无法钓取该段基因。如今,我们采用化学合成的方法人工构建基因片段,即:全基因合成拼接技术。可以为广大的科研朋友服务。

基因合成是指在体外合成双链DNA分子的一门技术,与寡核苷酸合成有所不同,寡核苷酸是单链的,所能合成的最长片段仅为100nt左右,而基因合成则为双链DNA分子合成,所能合成的长度范围50bp-12 kb。可根据客户需求,我中心可以提供全基因合成服务,速度快、周期短、价格优惠。合成的基因可以根据客户的需求连接到不同的载体上,最终提供的产品包括菌株以及冻干的质粒和全基因完整的测序报告。

全基因合成的适用范围:

A: 自然界中无法以常规实验手段得到的基因

B:研究人员通过自己的意愿设计基因序列,以得到自然界中不存在的基因

C:对已知基因序列进行大量密码子优化重排,以期达到对该基因进行高效表达或获得新的生物特性等研究目的

服务优势:

A:合成基因最长已达到10.5KB,已完成基因超过10000条
B:可以合成重复序列(重复次数无限制).高GC(小于80%).发夹(参照每200bp小于3个发夹为限).连续单一碱基重复(GC小于15个,AT小于20个)等富含特殊结构的基因
注:特殊结构基因合成的相关数据是根据我公司曾经成功合成过的基因序列所做的总结,以作为您设计基因序列时判断是否能顺利合成作为参考,具体还需以实际基因序列来定
C:基因可以克隆到客户提供或指定的表达载体上
D:免费提供基因结构设计.基因密码子优化,基因克隆表达方案设计等基因合成相关咨询服务.

全基因合成操作程序:

1、我们将对您需要合成的基因全序列进行分析,检查基因内部是否含有重复序列,然后根据序列的具体情况设计合成方案。

2、在得到您认可后,我们将立即进行单链Oligo DNA 合成,DNA片段拼接等工作。然后把全长基因克隆到载体中,再通过DNA测序确认合成基因的正确性。

3、测序结果如果发现有错误位点,我们会采取相应的技术手段进行修复校对,保证整个序列的正确性。

服务要求:

  • 请您以EMAIL的形式提供需要合成的基因的序列。
  • 请您说明实验的具体要求:如:使用何种酶切位点,进行克隆,以及需要克隆到何种载体等。
  • 本中心将免费提供PUC57-T载体,如果需要装在其它载体中,请客户自已提供。

结果提供

A: 基因合成报告单一份
B: 含目的基因的质粒(不少于1ug)一份
C: 含目的基因的菌株一份
D:基因合成的测序图谱一份


QPCR检测

逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)的原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用Oligo(dT)或随机引物利用逆转录酶反转录成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级,使一些极为微量RNA样品分析成为可能。该技术主要用于:分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。

操作步骤:
1、RNA提取并除去RNA中的基因组DNA污染
2、第一链cDNA的合成
3、用目的基因的上下游引物进行PCR反应
4、琼脂糖上进行凝胶电泳
5、成像分析软件Quantity One进行半定量
PCR条件的优化:
PCR条件的优化主要是①引物退火温度的调节,一般在引物设计软件推荐温度的上下2 ℃变化寻找最佳退火温度。②此外Mg2+浓度的调节也非常重要,通常最佳浓度为2mM左右。③引物和模板的量等。 
实验要求:
1、请您提供新鲜的且尽量多的材料,或直接提供纯化好的总RNA或DNA(大于5ug/样本)。如是如织:100-200mg
2、请通过EMAIL提供已知的全长基因序列。
3、请提供详细背景资料:DNA/RNA来源,丰度。
4、在实验前请您要确保目的基因可以表达,并确保您提供的实验信息的准确性。
服务承诺:
1.本公司会在最短的时间内快速将实验完成。    
2.本公司保证检测结果准确、客观、可信。
3. 本公司保证不对外公开或不向第三方提供客户相关信息。
结果提供:
1、实验详细步骤,和相关数据。
2、完整的实验报告实验图片(含软件分析结果)


ChIP服务

染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)是基于体内分析发展起来的方法,也称结合位点分析法,在过去十年已经成为表观遗传信息研究的主要方法。这项技术帮助研究者判断在细胞核中基因组的某一特定位置会出现何种组蛋白修饰ChIP不仅可以检测体内反式因子与DNA的动态作用,还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达的关系。近年来,这种技术得到不断的发展和完善。采用结合微阵列技术在染色体基因表达调控区域检查染色体活性,是深入分析癌症、心血管疾病以及中央神经系统紊乱等疾病的主要通路的一种非常有效的工具。

操作流程:

1.甲醛处理细胞固定
2.收集细胞,超声破碎,凝胶电泳检测超声片段大小,估计样本DNA浓度。
3.加入目的蛋白的抗体,与靶蛋白-DNA复合物相互结合
4.加入ProteinA/proteinG琼脂珠或磁珠,结合抗体-靶蛋白-DNA复合物,IP反应
5.对沉淀下来的复合物进行清洗,除去非特异性结合
6.洗脱,得到富集的靶蛋白-DNA复合物
7.解交联,纯化富集的DNA-片断
8.对富集得到的DNA片段进行QPCR反应

威斯腾服务流程


威斯腾生物服务项目

核磁共震NMR
分子生物学检测蛋白质与免疫学动物实验
实时荧光定量PCR单克隆抗体制备帕金森疾病模型
免疫共沉淀(Co-IP多克隆抗体制备抑郁症动物模型
ELISA(酶联免疫吸附法)技术Western-blot 实验服务脊髓损伤模型
生化指标检测蛋白双向电泳实验服务脑外损伤模型
双荧光素酶报告基因检测原核蛋白表达纯化骨神经损伤模型
染色质免疫共沉淀(ChIP真核蛋白表达纯化心肌缺血模型
GST pull DownITRAQ定量蛋白质组学心力衰竭模型
SLAC蛋白组学肺动脉高血压动物模型
高血压模型
病毒包装实验课题整体外包粥样动脉硬化模型
过表达/干扰慢病毒包装纯化整体课题外包大脑中动脉阻塞模型
过表达/干扰腺病毒包装纯化细胞整体实验外包慢性之气管炎模型
逆转录病毒包装纯化动物整体实验外包过敏性哮喘模型
腺相关病毒包装纯化肺炎大鼠模型
肝炎-肝硬化-肝癌模型
蛋白芯片原代细胞培养肝纤维化模型
细胞因子芯片骨髓间充质干细胞培养胆结石模型
BioPlex悬浮芯片脂肪干细胞培养急性胰腺炎模型
生长因子芯片心肌成纤维细胞培养急性肾衰竭模型
炎症因子芯片软骨细胞培养体内血栓模型
血管生成因子芯片血管内皮细胞培养关节炎模型
凋亡因子芯片神经元细胞培养I型和II型糖尿病模型
趋化因子芯片内皮组细胞原代培养裸鼠成瘤
HuProt TM 20K人类蛋白组芯片基因编辑动物
电生理相关服务动物整体实验服务
膜片钳实验
细胞生物学检测高通量测序代谢组学
细胞原代培养mRNA测序气相色谱GC/MS
MTT检测LncRNA测序液相色谱LC/MS
细胞凋亡检测全基因组测序
细胞周期检测RNA-Seq测序
细胞克隆形成实验外显子测序影像学相关实验
Transwell细胞迁移/侵袭16s扩增子测序Micro-CT
流式分选Small RNA测序小动物活体成像
CCK8/XTT检测宏基因组测序核磁共振
台盼蓝检测细胞活性单细胞测序PET-CT
药物筛选细胞学实验circleRNA测序
细胞粘附性检测甲基化测序基因编辑动物
细胞划痕实验条件性敲除小鼠/大鼠
细胞生物学整体实验全基因敲除小鼠/大鼠
细胞成管实验
病理检测CRISPR/Cas9细胞敲除/敲入基因芯片
扫描电镜基因定点突变细胞系LncRNA芯片
透射电镜单基因敲除细胞系miRNA芯片
HE染色多基因敲除细胞系mRNA芯片
免疫组化目的基因敲入细胞系甲基化芯片(限人和小鼠来源样本)
Tunel(原位末端凋亡法)检测报告基因敲入细胞系SNP芯片(限人和小鼠来源样本)
激光共聚焦miRNA/LncRNA敲除细胞系
免疫荧光
Masson染色CRISPR/Cas9动物敲除/敲入科研设计指导&文章评估/润色
原位杂交基因敲除大鼠/小鼠科研文献论著翻译
荧光原位杂交基因敲入大鼠/小鼠论文翻译润色服务
特殊染色(PSA、茜素红、阿尔新蓝等)临床实验/科研实验设计方案指导
行为学检测药物筛选服务项目药效学评价
旷场实验高通量自动药物筛选平台抗肿瘤药物药效学评价
重复性刻板行为检测细胞高内涵药物筛选平台心血管系统药物药效学评价
动物跑台检测蛋白质组学靶标研发平台泌尿系统药物药效学评价
强迫游泳分子药理研究平台内分泌系统药物药效学评价
生物膜片钳药物筛选平台抗炎免疫药物药效学评价
常规药物体外筛选


【本平台合作项目】

分子生物学、细胞生物学、基因敲出/入、模式动物、SPF动物保种、病理学检测、免疫学检测、影像学检测、原代培养、细胞药筛、CRISPR/Cas9基因编辑、基因芯片、高通量测序、蛋白组学、代谢组学、高通量高内涵筛选、药效学评价、药理毒理学实验、慢病毒包装与稳转株建立、SiRNA与纳米载药、ChIPCO-IP、生物信息学分析、知识产权服务! 
【全国免费热线】400-675-6758
【电话】 023-65316016,023-65316556
【邮箱】 china-western@163.com
【官网网址】www.cqwestern.com
【地址】 重庆市高新区二郎创业大道高科创业园D2

 

 

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