总抗氧化能力(T-AOC) 检测试剂盒(A015-1)-其它服务-技术服务-生物在线
总抗氧化能力(T-AOC) 检测试剂盒(A015-1)

总抗氧化能力(T-AOC) 检测试剂盒(A015-1)

商家询价

产品名称: 总抗氧化能力(T-AOC) 检测试剂盒(A015-1)

英文名称: T-AOC test kit A015-1

产品编号: IS103

产品价格: 1

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使用范围: null

武汉云克隆诊断试剂研究所
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[预期应用]
本试剂盒可测血清、血浆、组织,植物提取液等样本中总抗氧化能力(T-AOC)。
机体防御体系的抗氧化能力的强弱与健康程度存在着密切联系。该防御体系包括酶促体系与非酶促体系。许多酶是以微量元素为话性中心,例如:超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT). 谷胱甘肽-S-转移商(GST)等,非酶促反应体系中主要为维生素、氨基酸和金属蛋白质。例如,VE、胡萝卜素、VC、半胱氨酸、蛋氨服、色氨被、组氨酸、葡萄糖、铜兰蛋白、转铁蛋白、乳铁蛋白等。这个体系的防护氧化作用主要通过三条途径。(1)消除自由基和活性氧以免引发脂质过氧化: (2)分解过氧化物,阻断过氧化链。(3)除去起催化作用的金属离子。防御体系各成份之间相互起到了协同作用,以及代偿作用与依赖作用。

[需自备的设备及试剂]
1、分光光度计(比色测定波长为520nm)             

2、恒温水浴箱或恒温箱(孵育温度:37℃和90~100℃)             

3、台式离心机             

4、微量移液器及吸头           

5、漩涡混合仪       

6、蒸馏水或去离子水



[试剂盒的储存及有效期]
试剂盒2-8℃可保存6个月

1. Reagent 1:无色液体,  2-8℃保存。             

2. Reagent 2:白色晶体,  2-8℃避光保存。             

3. Reagent 3:黄色溶液, -20℃避光可保存1年。    

4. Reagent 3稀释液:2-8℃保存。       

5. Reagent 4:无色粘稠液体,室温保存。           

6. Reagent 5:无色液体,  室温保存。     

       

[试剂准备]
1. Reagent 2配制:使用时,加入120ml双蒸馏水溶解(粉末难溶,可置于37℃加快溶解速度)。

2. Reagent 3工作液制备:用R3稀释液按1:19的比例稀释R3。建议在使用前按所需量配制。



[标本处理]
1. 组织样本             
预处理:准确称量样品,按比例加入生理盐水,如1g样品加入9g生理盐水。在冰上匀浆,于4oC,12000 rpm/min 离心5min ,取上清液用于实验。  

注意:对于组织样本和细胞,需检测总蛋白浓度。建议使用IS003 BCA蛋白定量检测试剂盒测定蛋白质浓度。

      

2. 全血   
收集抗凝全血(肝素为抗凝剂),轻轻颠倒充分抗凝后,可直接定量吸取全血,用冷双蒸水按1:9比例制备溶血液,如取0.02ml全血,加入0.18ml双蒸水,混匀后制备1:9全血稀释液;也可定量吸取全血,转入EP管,低温冻存(温度越低越好),测定之前解冻并按比例加入冷双蒸水制成1:9全血稀释液用于检测。        

注意:不推荐使用EDTA作为抗凝剂。



[操作步骤]
1. 血清/血浆 T-AOC 实验

[实验原理]
生物体内含有多种抗氧化的化合物,能将Fe3+还原成Fe2+,Fe2+与菲罗啉反应生成稳定的络合物。它可以通过测量OD值来计算T-AOC。



[说明]
1. 样本不立即用于实验(如血清、血浆、组织等),可置于-80℃或低于-20℃保存。保存温度越低样本保存时间越长。

2. 垂直加样品和试剂,不要滴到试管表面。

3. 可加入Reagent 1后加入样品,需充分混合。

4. 如果检测如鼓膜组织、牙髓等微型样本,请用煮沸的肥皂液彻底清洁试管。

5. 请选用洁净的试管, 用于检测T-AOC、总氨基酸、VC、Ve的试管不建议用于测定SOD、GSH-PX、ATPase等,以免试管的残留物影响酶活性。

6. 用于T-AOC、总氨基酸、VC、Ve的试管洗涤时,先用煮沸的热洗涤剂溶液洗涤再,再用自来水冲洗10次以上,然后用蒸馏水漂洗一次,烘干或晾干, 以避免其他酶影响测量结果。

7. 实验中,在37℃水浴30分钟后试管中会出现一些沉积物,这些沉积物在加入Reagent 4后会消失,不会影响结果。

8. 为了使液体混合均匀,推荐使用涡流混合仪。

9. Reagent 4不易吸取,移液时,请缓慢吸取和加入。

10. 该试剂盒仅供体外科研和实验室使用。



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