IP上海锐赛生物技术有限公司

银牌供应商 

技术服务信息

服务名称:IP
服务类别:免疫学服务 - 抗体制备服务
价格:1000元
允许参观:允许参与实验
所在区域:上海.上海
更新时间:2018/7/23 16:10:00
浏览人数:92
诚信指数:3040点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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技术服务详细描述

 免疫沉淀(IP)是利用固定在磁珠或琼脂糖树脂等固相支持物上的特异性抗体对抗原进行小型亲和纯化的方法。需要从细胞或组织裂解物中分离用于免疫印迹检测或其他检测技术的蛋白和其他生物分子时,免疫沉淀是最常用的方法之一。


基本实验步骤

  1. 收获细胞,加入适量细胞IP裂解缓冲液(含蛋白酶抑制剂),冰上或者4℃裂解30min, 12,000g离心30 min后取上清;

  2. 取少量裂解液以备Western blot分析,剩余裂解液将1μg相应的抗体和10-50 μl protein A/G-beads加入到细胞裂解液,4°C缓慢摇晃孵育过夜;

  3. 免疫沉淀反应后,在4°C 以3,000 g速度离心5 min,将protein A/G-beads离心至管底;将上清小心吸去,protein A/G-beads用1ml裂解缓冲液洗3-4次;最后加入15μl的2×SDS 加样缓冲液,沸水煮10分钟;

  4. SDS-PAGE, Western blotting或进行质谱分析。

 
实验结果展示图

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