蛋白质组学 Label-Free苏州普信生物医药科技有限公司

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技术服务信息

服务名称:蛋白质组学 Label-Free
服务类别:蛋白相关服务 - 质谱服务
价格:请联系0512-62982759元
允许参观:允许参与实验
所在区域:江苏.苏州
更新时间:2018/11/22 9:16:00
浏览人数:29
诚信指数:57点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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技术服务详细描述

Label-free技术即非标记定量蛋白质组分析技术,是通过液质联用技术对蛋白质酶解肽段进行质谱分析,无需使用昂贵的稳定同位素标签做标记,只需分析大规模鉴定蛋白质时所产生的质谱数据,比较不同样本中相应肽段的信号强度,从而肽段对应的蛋白质进行相对定量。

技术原理
每条肽段的丰度(量)与其在MS1中的峰面积或信号强度成正比;而不同样本的同一条肽段在色谱上的保留时间是一致的,因此,可通过对比MS图谱,再整合到相应蛋白,实现对蛋白质在不同样本中的相对表达水平的定量分析。

实验流程
提取样本中的总蛋白,取出一部分做蛋白浓度测定及SDS-PAGE检测,另取部分进行胰蛋白酶酶解,对酶解肽段除盐后,对样本进行质谱分析及数据分析,如图所示


技术特点
1、无需标记,操作简单;
2、不受比较样品数限制;
3、对实验操作稳定性、重复性要求高,要求至少做三次技术重复或生物重复;
4、准确性较标记定量差。

应用领域
1、适合大样本量的定量比较
2、对无法用标记定量实现的实验设计,易用label-free技术
3、要求物种具有蛋白质参考数据库、EST序列(转录组)或基因组注释信息






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