Chip检测基尔顿生物科技(上海)有限公司

银牌供应商 

技术服务信息

服务名称:Chip检测
服务类别:分子生物学服务 - 分子生物学整体服务
价格:询价
允许参观:允许参与实验
所在区域:上海.上海
更新时间:2019/6/25 10:04:00
浏览人数:64
诚信指数:199点
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使用范围:仅限科研使用,不能应用于临床
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技术服务详细描述

 Chip检测实验操作流程: 

1 、样品准备与交联 
细胞收集后,用37%的formaldehyde处理细胞,交联核酸与DNA结合蛋白;
2. 超声打断染色质 
裂解细胞,用Bioruptor将染色质超声破碎成200-1000bp片断;将片段分为两份,一份用于免疫共沉淀,一份用于对照。
3 、免疫共沉淀 (IP) 
取B步骤所得一份片断与ChIP特异抗体结合进行免疫共沉淀,利用免疫磁珠法富集抗体复合物。
4 、解交联及纯化 DNA 
将富集的DNA/蛋白复合物解交联释放DNA片段,并进行纯化(IP DNA);B步骤所得用于对照(Input DNA)的片断作不进行IP实验,但也要解交联并纯化。
5 、 DNA 段 PCR 扩增 
针对ChIP DNA, Input DNA及对照DNA的目的片段设计特异性引物并进行荧光定量PCR扩增。
 6 、结果分析 
%Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×100%
Fold Enrichment = [%(ChIP/Input)] / [%( Negative control/Input)]
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